[發明專利]通過適體-介導的多腺苷酸化信號可及性來調控基因表達

在審

• 申請號: 201880026346.5
• 申請日: 2018-02-21
• 公開（公告）號: CN110636868A
• 公開（公告）日: 2019-12-31
• 發明（設計）人: 郭雪翠;J.韓;仲昭敬
• 申請（專利權）人: 梅里特斯英國第二有限公司
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;C12N15/113;C12N15/115
• 代理公司: 72001 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 初明明;黃登高

1.用于調控靶基因的表達的多核苷酸盒，其包含核糖開關，其中所述核糖開關包含效應物莖環和適體，其中所述效應物莖包含多腺苷酸化信號，和其中所述適體和效應物莖環通過可替代共有莖臂連接，所述可替代共有莖臂包含與適體莖的非共有臂和效應物莖環的非共有臂互補的序列。

2.權利要求1的多核苷酸盒，其中所述適體結合小分子配體。

3.權利要求1的多核苷酸盒，其中與適體莖中的序列和效應物莖環中的序列互補的可替代共有莖臂的部分是4-8個核苷酸、5-7個核苷酸、5個核苷酸或6個核苷酸。

4.權利要求1的多核苷酸盒，其中所述適體莖是6-12個堿基對、7-10個堿基對、8個堿基對或9個堿基對。

5.權利要求1的多核苷酸盒，其中所述效應物莖環的莖是4-24個堿基對、5-20個堿基對、9-14個堿基對、9個堿基對、10個堿基對、11個堿基對或12個堿基對。

6.權利要求1-5的多核苷酸盒，其中所述效應物莖環位于適體的3′，使得可替代共有莖臂包含3′適體莖臂的全部或一部分和效應物莖的5′臂的全部或一部分。

7.權利要求6的多核苷酸盒，其中所述多腺苷酸化信號是AATAAA或ATTAAA。

8.權利要求1-5的多核苷酸盒，其中所述效應物莖環位于適體的5′，使得可替代共有莖臂包含5′適體莖臂的全部或一部分和效應物莖的3′臂的全部或一部分。

9.權利要求8的多核苷酸盒，其中所述多腺苷酸化信號是下游元件(DSE)。

10.權利要求1-5的包含兩個核糖開關的多核苷酸盒，其中第一個核糖開關的效應物莖環包含多腺苷酸化信號AATAAA或ATTAAA的全部或一部分，和第二個核糖開關的效應物莖環包含下游元件(DSE)的全部或一部分。

11.權利要求10的多核苷酸盒，其中所述兩個核糖開關各自包含結合相同配體的適體。

12.權利要求10的多核苷酸盒，其中所述兩個核糖開關包含結合不同配體的不同適體。

13.一種調節靶基因的表達的方法，其包括：

a. 將一個或多個權利要求1-5的多核苷酸盒插入靶基因的3′非翻譯區中，

b. 將包含多核苷酸盒的靶基因引入細胞中，和

c. 將細胞暴露于有效增加靶基因的表達的量的結合適體的配體。

14.權利要求13的方法，其中所述配體是小分子。

15.權利要求13的方法，其中所述效應物莖環位于適體的3′，使得可替代共有莖臂包含3′適體莖臂的全部或一部分和效應物莖的5′臂的全部或一部分。

16.權利要求15的方法，其中所述多腺苷酸化信號是AATAAA或ATTAAA。

17.權利要求13的方法，其中所述效應物莖環位于適體的5′，使得可替代共有莖臂包含5′適體莖臂的全部或一部分和效應物莖的3′臂的全部或一部分。

18.權利要求17的多核苷酸盒，其中所述多腺苷酸化信號是下游元件(DSE)。

19.權利要求13或權利要求14的方法，其中將兩個核糖開關插入靶基因的3′ UTR中，其中第一個核糖開關的效應物莖環包含多腺苷酸化信號AATAAA或ATTAAA的全部或一部分，和第二個核糖開關的效應物莖環包含下游元件(DSE)的全部或一部分。