[發明專利]成纖維細胞衍生的外泌體刺激血管生成

在審

• 申請號: 201880025815.1
• 申請日: 2018-04-19
• 公開（公告）號: CN110520140A
• 公開（公告）日: 2019-11-29
• 發明（設計）人: P·奧希隆;T·艾實姆;K·科梅拉
• 申請（專利權）人: 菲格內有限責任公司
• 主分類號: A61K35/33
• 分類號: A61K35/33;A61L27/38;A61P9/10;A61P1/04;A61P17/02;A61P9/00
• 代理公司: 11038 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 張小勇<國際申請>=PCT/US2018

本發明公開了可用于通過施用膜囊泡(例如成纖維細胞來源的外泌體)和/或通過從與成纖維細胞來源的外泌體接觸的血細胞誘導血管生成細胞因子來直接刺激血管生成的方法、手段和組合物。本發明提供了通過局部或全身施用外泌體(包括來源于成纖維細胞的外泌體)治療其中血管生成是有益的疾病的手段，其中成纖維細胞在基礎條件或缺氧條件下培養。在其他實施方案中，來源于成纖維細胞的外泌體用于增強內源性再生過程，例如造血、血管生成和神經發生，以及增強通過施用外源性治療劑如細胞、生長因子或基因刺激的再生過程。

本申請要求2017年4月19日提交的美國臨時專利申請系列號62/487,143的優先權，其全部內容通過引用并入本文。

技術領域

本公開內容的實施方案至少包括細胞生物學、分子生物學、生理學和醫學的領域。

發明背景

外泌體是具有高度確定的均質特征的納米顆粒(40-100nm)[1]。外泌體與微泡不同，微泡以非特異性方式釋放(圖1)。最初，這些納米顆粒被認為是細胞蛋白質周轉的副產物[2]，它們正在開始被理解為在從神經傳遞[3]到免疫調節[2]到傳染病[4]的各個領域中的細胞內通訊的重要手段。與其他分泌的囊泡相比，外泌體具有好得多的確定的生物物理和生化特性，特別是它們的直徑為40–100nm(在蔗糖中的密度為1.13–1.19g/ml，并且能夠以100,000g沉淀它們[1]。它們的膜富含膽固醇、鞘磷脂和神經酰胺，并且已知它們含有脂質筏。最初發現外泌體是綿羊網織紅細胞成熟過程中轉鐵蛋白受體輸出的一種手段[5]。近些年來，對外泌體的興趣激增，據報道，各種各樣的細胞分泌這些納米顆粒，包括T細胞[6，7]、B細胞[8，9]、樹突狀細胞[10，11]、腫瘤細胞[12，13]、神經元[14、15]、少突膠質細胞[16]和胎盤細胞[17]。

本公開內容至少提供了使用外泌體的治療領域中長期以來的需求的解決方案。

發明概述

本公開內容的實施方案涉及出乎意料的發現，即膜囊泡例如外泌體具有治療性質。盡管在某些情況下，治療性質可以是任何類型，但在特定情況下，膜囊泡具有血管生成、造血和/或神經發生刺激的性質。盡管膜囊泡的來源可以是任何來源，但在特定的實施方案中，外泌體的來源是來自哺乳動物細胞。在特定的實施方案中，膜囊泡來源于一種或多種類型的成纖維細胞。在特定的實施方案中，膜囊泡被用于從一種或多種類型的細胞遞送一種或多種治療信號。在至少某些情況下，膜囊泡允許利用細胞療法的益處而沒有例如需要存儲和遞送實際細胞的缺點。

本公開內容的具體實施方案涉及血管生成刺激的領域，包括例如使用條件培養基刺激血管生成。在特定的實施方案中，本公開內容包括使用由成纖維細胞條件培養基產生的膜囊泡用于任何治療和/或預防性應用，至少包括刺激血管生成。

實施方案的實例包括刺激個體中血管生成的方法，其包括向個體施用有效量的成纖維細胞來源的外泌體或其一種或多種生物活性級分的步驟。例如，如果外泌體是從成纖維細胞的培養物中獲得的，則可以認為它來源于成纖維細胞。為了產生具有一種或多種特征的外泌體，可以對培養物的培養基進行特殊處理，例如，培養基可以包含一種或多種對成纖維細胞是促有絲分裂的因子。