[發明專利]成體多能干細胞的制備、擴增及應用在審
| 申請號： | 201880022885.1 | 申請日： | 2018-04-03 |
| 公開（公告）號： | CN110546251A | 公開（公告）日： | 2019-12-06 |
| 發明（設計）人： | 李劭偉;胡敏;赫爾曼·彼得·洛倫茲 | 申請（專利權）人： | 小利蘭·斯坦福大學托管委員會 |
| 主分類號： | C12N5/071 | 分類號： | C12N5/071;A61K35/12 |
| 代理公司： | 44348 廣州文冠倪律知識產權代理事務所(普通合伙) | 代理人： | 倪小敏;何錦標<國際申請>=PCT/US |
| 地址： | 美國加利*** | 國省代碼： | 美國;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 細胞 休眠 活化 多能干細胞 血液樣品 哺乳動物 干細胞 外周血 細胞群 小細胞 富集 分化 治療 | ||
1.一種組合物，其包含至少1000個細胞，其中至少50％的所述細胞是表達CD45且直徑小于5 μm的CD45+細胞。
2.根據權利要求1所述的組合物，其中所述CD45+細胞進一步被表征為CD34陽性且ABCG2陰性。
3.根據權利要求1或2所述的組合物，其中至少75％的所述細胞是CD45+細胞。
4.根據權利要求1或2所述的組合物，其中至少95％的所述細胞是CD45+細胞。
5.根據權利要求1-4的任一項所述的組合物，其包含至少10,000個細胞。
6.根據權利要求1-5的任一項所述的組合物，其中少于20％的所述細胞是紅細胞。
7.根據權利要求1-6的任一項所述的組合物，其中所述CD45+細胞的直徑小于3 μm。
8.根據權利要求1-6的任一項所述的組合物，其中所述CD45+細胞的直徑是約2 μm至約3μm。
9.根據權利要求1-8的任一項所述的組合物，其中所述CD45+細胞進一步被表征為Lin陰性。
10.根據權利要求1-9的任一項所述的組合物，其中所述CD45+細胞包含小RNA和核糖體RNA，其中小RNA與核糖體RNA的比例為至少約20：1、或至少約15：1、或至少約10：1、或至少約5：1。
11.根據權利要求1-10的任一項所述的組合物，其中所述CD45+細胞的核質比（v/v）是至少約9：1、或至少約8：1、或至少約7：1、或至少約6：1、或至少約5：1。
12.根據權利要求1-11的任一項所述的組合物，其中所述CD45+細胞進一步表達一種或多種選自以下的標記物：CD44、CD150、Sca1、c-kit、Thy1.1(CD90.1)、Oct 4、SSEA1、Nanog、Vasa、CD133和CD105。
13.根據權利要求1-12的任一項所述的組合物，其中所述CD45+細胞不表達一種或多種選自以下的標記物：CD41、Lin、E-鈣粘蛋白和CD184。
14.根據權利要求1-13的任一項所述的組合物，其中所述CD45+細胞能夠被包含一種或多種因子的培養基活化，其中被活化的細胞表達ABCG2。
15.一種培養細胞的方法，其包含：在培養基中培養多種哺乳動物細胞，該培養基與選自原代肝細胞、人肝母細胞瘤（HepG2）細胞、肝細胞細胞系和小鼠胚胎成纖維（MEF）細胞系中的至少一種接觸或已經用其進行了調節。
16.根據權利要求15所述的方法，其中所述細胞（a）直徑小于5 μm，且（b）表達CD45。
17.根據要求要求15所述的方法，其中所述細胞進一步被表征為CD34陽性和ABCG2陰性。
18.根據權利要求17所述的方法，其中所述細胞在培養之后表達ABCG2。
19.根據權利要求18所述的方法，其中所述培養至少持續1小時。
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