[發明專利]UNYLINKER快速裂解

在審

• 申請號: 201880019635.2
• 申請日: 2018-03-22
• 公開（公告）號: CN110446718A
• 公開（公告）日: 2019-11-12
• 發明（設計）人: D·J·漢森;M·梅勒加爾德;M·莫根森
• 申請（專利權）人: 羅氏創新中心哥本哈根有限公司
• 主分類號: C07H1/00
• 分類號: C07H1/00;C07H21/00
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 張建;黃革生

1.用于從固體支持物上裂解寡核苷酸的方法，所述方法包含下列步驟：(i)用濃氫氧化銨溶液處理與固體支持物結合的寡核苷酸至少約30分鐘并且不再超過約6小時，其中與固體支持物連接的寡核苷酸的3′核苷為LNA核苷，其如式I或II在3′位置共價連接至固體支持物上，

其中

A′和A″之一為SM或L-SM，

SM是支持媒介物；

L為連接部分，

A′和A″的另一個為H或取代基；

R_u、R_v、R_w、R_x、R_y和R_z各自為H、烷基、取代的烷基、鏈烯基、取代的鏈烯基、炔基或取代的炔基；

Y₁和Y₂各自彼此獨立地為O、S、NR₁CH₂或CR₁R₁：R₁為H、烷基、取代的烷基、鏈烯基、取代的鏈烯基、炔基或取代的炔基；

G₁為O、S或NR′；其中R′為H或取代基，

X為O或S，R^c為H或氰基乙基；其中堿基為核堿基，且R³為寡核苷酸的其余部分。

2.根據權利要求1的方法，其中與固體支持物連接的寡核苷酸的3′核苷是LNA核苷，其如式A或C在3′位共價連接至固體支持物上：

其中黑色圓圈表示固體支持物；X為O或S，R^c為H或氰基乙基；R^e為芳基或C_1-10烷基，例如苯基、異丙基或甲基；其中堿基為核堿基，R³為寡核苷酸的其余部分。

3.根據權利要求1或2的方法，其中與固體支持物連接的寡核苷酸的3′核苷是LNA核苷，其如式I或式A在3′位置共價連接至固體支持物上。

4.根據權利要求1或2的方法，其中與固體支持物連接的寡核苷酸的3′核苷是LNA核苷，其如式II或式C在3′位置共價連接至固體支持物上。

5.根據權利要求1-4任一項的方法，其中A”或R^e為甲基、異丙基或苯基。

6.根據權利要求1-5任一項的方法，其中R^c為氰基乙基。

7.根據權利要求1-6任一項的方法，其中X為O。

8.根據權利要求1-6任一項的方法，其中X為S。

9.根據權利要求1-8任一項的方法，其中用氫氧化銨溶液處理與固體支持物結合的寡核苷酸的步驟在室溫至約60℃的溫度下進行。

10.根據權利要求1-8任一項的方法，其中用氫氧化銨溶液處理與固體支持物結合的寡核苷酸的步驟在約50℃至約60℃例如在約55℃的溫度下進行。

11.根據權利要求1-10任一項的方法，其中用氫氧化銨溶液處理與固體支持物結合的寡核苷酸的步驟進行至少約30分鐘且不超過約4小時的時間期限。

12.根據權利要求1-10任一項的方法，其中用氫氧化銨溶液處理結合至固體支持物的寡核苷酸的步驟進行至少約30分鐘且不超過約2小時。

13.根據權利要求1-10的方法，其中用氫氧化銨溶液處理結合至固體支持物的寡核苷酸的步驟進行至多約1小時或約1小時。