[發(fā)明專利]用于在相互作用測(cè)定中調(diào)節(jié)信號(hào)強(qiáng)度的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201880019092.4
• 申請(qǐng)日: 2018-01-26
• 公開（公告）號(hào): CN110392831B
• 公開（公告）日: 2023-09-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: G.庫爾斯;E.洛佩斯-卡勒;E.赫格爾;J.勒德爾;E.赫斯;J.考夫曼;M.基爾欽鮑爾
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 豪夫邁·羅氏有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/543
• 分類號(hào): G01N33/543
• 代理公司: 中國(guó)專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 甘霖;黃希貴

本發(fā)明涉及用于在相互作用測(cè)定中測(cè)定樣品中的分析物的方法，所述方法包括使所述樣品與相互作用調(diào)節(jié)劑接觸，其中所述相互作用調(diào)節(jié)劑選自聚（4?苯乙烯磺酸?共?馬來酸（PSSM）、氨基葡聚糖、羧甲基葡聚糖、聚?（2?丙烯酰胺基?2?甲基?1?丙磺酸（PAMPS）、三乙胺、三乙醇胺、牛磺酸和十二烷基硫酸鹽。本發(fā)明還涉及用于在相互作用測(cè)定中測(cè)定樣品中的分析物的方法，所述方法包括使所述樣品與相互作用調(diào)節(jié)劑接觸，其中所述相互作用調(diào)節(jié)劑在低分析物濃度下是所述相互作用測(cè)定的增強(qiáng)劑，并且在高分析物濃度下是所述相互作用測(cè)定的延遲劑，并且其中所述相互作用調(diào)節(jié)劑是聚（4?苯乙烯磺酸?共?馬來酸）（PSSM）和/或聚丙烯酸（PAA）。本發(fā)明進(jìn)一步涉及試劑盒，其包括特異性檢測(cè)樣品中的分析物的檢測(cè)試劑和至少一種本發(fā)明的相互作用調(diào)節(jié)劑。進(jìn)一步地，本發(fā)明涉及與本發(fā)明的方法和試劑盒有關(guān)的裝置和用途。

本發(fā)明涉及用于在相互作用測(cè)定中測(cè)定樣品中的分析物的方法，所述方法包括使所述樣品與相互作用調(diào)節(jié)劑接觸，其中所述相互作用調(diào)節(jié)劑選自聚（4-苯乙烯磺酸-共-馬來酸（PSSM）、氨基葡聚糖、羧甲基葡聚糖、聚-（2-丙烯酰胺基-2-甲基-1-丙磺酸（PAMPS）、三乙胺、三乙醇胺、牛磺酸和十二烷基硫酸鹽。本發(fā)明還涉及用于在相互作用測(cè)定中測(cè)定樣品中的分析物的方法，所述方法包括使所述樣品與相互作用調(diào)節(jié)劑接觸，其中所述相互作用調(diào)節(jié)劑在低分析物濃度下是所述相互作用測(cè)定的增強(qiáng)劑，并且在高分析物濃度下是所述相互作用測(cè)定的延遲劑，并且其中所述相互作用調(diào)節(jié)劑是聚（4-苯乙烯磺酸-共-馬來酸）（PSSM）和/或聚丙烯酸（PAA）。本發(fā)明進(jìn)一步涉及試劑盒，其包括特異性檢測(cè)樣品中的分析物的檢測(cè)試劑和至少一種本發(fā)明的相互作用調(diào)節(jié)劑。進(jìn)一步地，本發(fā)明涉及與本發(fā)明的方法和試劑盒有關(guān)的裝置和用途。

免疫測(cè)定，特別是均相免疫測(cè)定，是用于體外診斷測(cè)試的自動(dòng)化進(jìn)行的通用測(cè)試系統(tǒng)，因?yàn)樗鼈兲峁┝擞糜谂R床樣品中的分析物的快速、成本有效和準(zhǔn)確測(cè)定的手段。均相免疫測(cè)定具有準(zhǔn)均相測(cè)定的益處，其不需要任何分離或洗滌步驟，用于從結(jié)合的復(fù)合物中去除未結(jié)合的結(jié)合配偶體。由于其簡(jiǎn)單的一步程序及其短周轉(zhuǎn)時(shí)間，均相免疫測(cè)定是用于在自動(dòng)化分析儀中應(yīng)用的理想候選物，并且照常規(guī)用于臨床診斷中，用于在臨床化學(xué)分析儀上定量血清蛋白、治療藥物和濫用藥物。一類特殊的均相免疫測(cè)定是凝集免疫測(cè)定，其中基于抗原和抗體之間的特異性凝集反應(yīng)檢測(cè)特異性抗原或抗體。在此類免疫測(cè)定中，通常將結(jié)合配偶體、針對(duì)待測(cè)定抗原的抗體或針對(duì)待測(cè)定抗體的抗原與可能含有待測(cè)定分析物的樣品進(jìn)行接觸，并且通過樣品的比濁或濁度測(cè)量，確定起因于結(jié)合配偶體的復(fù)合物形成所產(chǎn)生的凝集量級(jí)。這些測(cè)量的光信號(hào)與分析物的量相關(guān)聯(lián)。

已知特定化合物調(diào)節(jié)（加速或減速）凝集免疫測(cè)定的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)，導(dǎo)致信號(hào)強(qiáng)度的調(diào)節(jié)（增加或減少）。對(duì)于低分析物濃度，需要更高的信號(hào)強(qiáng)度，以在測(cè)定的測(cè)量范圍的低濃度范圍內(nèi)獲得足夠的分析靈敏度和可報(bào)告的結(jié)果。對(duì)于高分析物濃度，需要較低的信號(hào)強(qiáng)度，以獲得在測(cè)量范圍的高濃度范圍內(nèi)可區(qū)分的光信號(hào)和可報(bào)告的結(jié)果。用于調(diào)節(jié)信號(hào)強(qiáng)度的方法具有拓寬測(cè)定的測(cè)量范圍的潛力，無論是在下端還是上端、或兩者。通過系統(tǒng)地使用調(diào)節(jié)化合物用于建立所需的分析靈敏度和動(dòng)態(tài)范圍，此類方法還允許快速和改善的測(cè)試開發(fā)。目前的免疫測(cè)定經(jīng)常不能用現(xiàn)有技術(shù)方法覆蓋臨床樣品中存在的整個(gè)分析物濃度范圍。

US?2012?0094?394描述了離液劑對(duì)凝集測(cè)定的延遲作用。本發(fā)明人解決了這一問題，即分析物的測(cè)量?jī)H在稱為動(dòng)態(tài)范圍的一定濃度范圍內(nèi)是可能的。過量的分析物濃度不能生成凝集反應(yīng)。為了測(cè)量超過可測(cè)量濃度范圍的樣品濃度，必須執(zhí)行稀釋步驟。這些稀釋步驟增加了工作負(fù)荷以及測(cè)定時(shí)間和測(cè)定成本。根據(jù)本發(fā)明，通過添加離液劑如尿素，成功地實(shí)現(xiàn)了在比濁法免疫測(cè)定中用于測(cè)定更高濃度的動(dòng)態(tài)范圍的增加。該化合物在劑量-反應(yīng)曲線的較高濃度范圍下導(dǎo)致較低的信號(hào)強(qiáng)度和可區(qū)分的信號(hào)，因此得到較高的上測(cè)量范圍。然而，所提出的機(jī)制也是離液化合物的缺點(diǎn)：離液化合物破壞抗體的3-D結(jié)構(gòu)，并且隨后改變抗體對(duì)抗原的親和力。因此，更高的分析物濃度可以生成可區(qū)分的濃度相關(guān)信號(hào)。但是，取決于所利用的抗體和目的分析物，該機(jī)制可以不利地影響測(cè)定性能。甚至可能發(fā)生檢測(cè)表位的破壞。在US?4?362?531中，離液劑用作添加劑，用于減少測(cè)定中的非特異性結(jié)合。