[發(fā)明專利]用于預(yù)防和治療癌癥與衰老的內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄酶抑制和細胞靶向

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201880017233.9
• 申請日: 2018-01-23
• 公開（公告）號: CN110418840A
• 公開（公告）日: 2019-11-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: A·古德科夫;K·利昂諾娃
• 申請（專利權(quán)）人: 健康研究股份有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C12Q1/70
• 代理公司: 北京市鑄成律師事務(wù)所 11313
• 代理人: 郗名悅;劉文娜

1.一種用于降低真核細胞群中遺傳不穩(wěn)定性的方法，所述方法包括向所述細胞內(nèi)引入逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)抑制劑，使得由LINE1的ORF2編碼的RT(其中所述RT被稱為RT^LINE)的活性受到抑制，并且因此所述細胞表現(xiàn)出降低的遺傳不穩(wěn)定性。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述細胞群包括癌細胞、癌前細胞、體細胞或其組合。

3.如權(quán)利要求2所述的方法，所述方法包括將所述RT抑制劑引入所述細胞群的子代中，并且其中所述細胞群的子代包括所述降低的遺傳不穩(wěn)定性。

4.如權(quán)利要求2所述的方法，其中所述降低的遺傳不穩(wěn)定性包括表現(xiàn)出以下中的至少一者的細胞：較少的點突變、較少的染色體插入、較少的染色體缺失、較少的擴增、轉(zhuǎn)移能力的降低、永生化能力降低或?qū)σ环N或多種藥劑抗性發(fā)展的降低，其中所述遺傳不穩(wěn)定性的降低是相對于對照的。

5.如權(quán)利要求4所述的方法，其中：i)所述點突變至少部分地由所述RT的整合酶組分的內(nèi)切核酸酶活性引起；ii)所述插入包括一個或多個重復(fù)序列元件的新拷貝的整合，或新假基因的整合，或它們的組合；iii)所述缺失包括由重復(fù)序列元件的整合拷貝包圍的染色體區(qū)段的丟失；iv)所述擴增包括基因組片段的新拷貝，所述基因組片段包含被重復(fù)序列元件的新整合拷貝包圍的一個或多個功能基因。

6.如權(quán)利要求4所述的方法，其中所述細胞群中的至少一些細胞和/或所述細胞的子代相對于對照表現(xiàn)出以下中的至少一者：i)對藥劑的較低抗性，和/或ii)降低的轉(zhuǎn)移能力，或iii)較少的衰老跡象。

7.如權(quán)利要求4所述的方法，其中所述對照包括從未抑制RT活性的細胞中獲得的遺傳不穩(wěn)定性值。

8.如權(quán)利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述細胞群在體外，或存在于多細胞生物體中。

9.如權(quán)利要求8所述的方法，其中所述細胞群是哺乳動物細胞。

10.如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述哺乳動物細胞是人類細胞。

11.如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述細胞群未被人免疫缺陷病毒(HIV)感染，并且其中所述群體中的細胞不包含整合的HIV原病毒。

12.如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述細胞群由實體瘤構(gòu)成，或者其中所述細胞群包含血液癌細胞。

13.如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述細胞群包括個體中的癌細胞，并且其中在一定時間段內(nèi)進行引入所述RT抑制劑，在此期間：i)所述癌細胞不會對所述時間段內(nèi)還向所述個體施用的化學(xué)治療劑產(chǎn)生抗性，和/或ii)相對于對照，所述癌細胞對所述時間段內(nèi)還向所述個體施用的化學(xué)治療劑產(chǎn)生較小的抗性。

14.如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述細胞群包括個體中的體細胞，并且其中在一定時間段內(nèi)進行引入所述RT抑制劑，在此期間所述個體的脆弱指數(shù)得到改善，或者所述個體的脆弱指數(shù)的惡化相對于對照變慢。

15.一種用于表征測試藥劑是否是在如權(quán)利要求11所述的方法中用作逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)抑制劑的候選物的方法，所述方法包括：

i)使表達由LINE1的ORF2編碼的RT(RT^LINE)的細胞與一種或多種測試藥劑接觸；

ii)測試所述細胞中遺傳不穩(wěn)定性的變化；和

iii)通過確定所述細胞和/或其子代相對于對照降低的遺傳不穩(wěn)定性來確定所述測試藥劑是候選物；或

iii)通過確定所述細胞和/或其子代相對于對照的遺傳不穩(wěn)定性未降低或升高來確定所述測試藥劑不是候選物。