[發明專利]再生功能性神經元用于治療因血流破壞引起的神經損傷

在審

• 申請號: 201880014584.4
• 申請日: 2018-02-28
• 公開（公告）號: CN110366423A
• 公開（公告）日: 2019-10-22
• 發明（設計）人: 陳功
• 申請（專利權）人: 賓州研究基金會
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;C12N15/861;C12N15/11
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳揚揚;錢文宇

1.一種治療有需要的個體對象中CNS中正常血流的破壞的影響的方法，包括：

將治療有效劑量的外源性NeuroD1給予正常血流已被破壞的區域。

2.如權利要求1所述的方法，其中給予外源性NeuroD1包括向該區域遞送包含編碼NeuroD1的核酸的表達載體。

3.如權利要求1或2所述的方法，其中給予外源性NeuroD1包括向該區域遞送包含編碼NeuroD1的核酸的重組病毒表達載體。

4.如權利要求1-3中任一項所述的方法，其中表達外源性NeuroD1包括向該區域遞送包含編碼NeuroD1的核酸的重組腺相關病毒表達載體。

5.如權利要求1-4中任一項所述的方法，其中表達外源NeuroD1包括向該區域遞送以下的有效“翻轉切除”重組表達載體組合：1)重組腺相關病毒表達載體，其包含編碼NeuroD1的核酸，和2)重組腺相關病毒表達載體，其包含編碼位點特異性重組酶的核酸。

6.如權利要求1-5中任一項所述的方法，其中NeuroD1是遞送至該區域的唯一外源表達的轉錄因子。

7.如權利要求1-6中任一項所述的方法，其中在CNS中正常血流被破壞后的一定時間給予外源性NeuroD1，此時存在反應性星形膠質細胞。

8.如權利要求1-7中任一項所述的方法，其中在CNS中正常血流被破壞后的一定時間給予外源性NeuroD1，此時神經膠質細胞是反應性的。

9.如權利要求1-8中任一項所述的方法，其中CNS中正常血流的破壞是由于選自下組的紊亂：缺血，血栓形成，栓塞，出血，腦震蕩，沖擊，滲透，腫瘤，炎癥，感染，慢性疾病介導的血管限制及其任何兩種或更多種的組合。

10.如權利要求1-9中任一項所述的方法，其中CNS中正常血流的破壞是由于選自下組的紊亂：缺血性中風；出血性中風；腦動脈瘤；創傷性腦損傷；腦震蕩；沖擊；滲透；腫瘤；炎癥；感染；創傷性脊髓損傷；缺血性或出血性脊髓病(脊髓梗死)；由心臟驟停或嚴重低血壓(休克)引起的全局缺血；由缺氧，低血糖或貧血引起的缺氧缺血性腦病；由感染性心內膜炎或心房粘液瘤引起的CNS栓塞；纖維軟骨栓塞性脊髓病；兒童白血病引起的CNS血栓形成；由腎病綜合征(腎病)，慢性炎性疾病，妊娠，使用基于雌激素的避孕藥，腦膜炎，脫水引起的腦靜脈竇血栓形成；或其任何兩種或更多種的組合。

11.如權利要求1-10中任一項所述的方法，其中給予治療有效劑量的NeuroD1包括給予包含編碼NeuroD1蛋白的核酸序列的重組表達載體，其中編碼NeuroD1蛋白的核酸序列包括選自下組的核酸序列：編碼SEQ ID NO：2的核酸序列或其功能片段；編碼SEQ ID NO：4的核酸序列或其功能片段；SEQ ID NO：1或其功能片段；SEQ ID NO：3或其功能片段；和編碼與SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：4具有70％，71％，72％，73％，74％，75％，76％，77％，78％，79％，81％，82％，83％，84％，85％，86％，87％，88％，89％，90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％或更高的相同性的蛋白質的核酸序列，或其功能片段。

12.如權利要求1-11中任一項所述的方法，其中給予治療有效劑量的NeuroD1包括在損傷區域中或附近立體定向注射。

13.如權利要求1-12中任一項所述的方法，其中編碼NeuroD1的核酸序列與遍在啟動子操作性地連接。

14.如權利要求5-12中任一項所述的方法，其中編碼位點特異性重組酶的核酸序列與神經膠質細胞特異性啟動子操作性地連接。