[發明專利]方法在審
| 申請號： | 201880010629.0 | 申請日： | 2018-02-06 |
| 公開（公告）號： | CN110312805A | 公開（公告）日： | 2019-10-08 |
| 發明（設計）人： | G.瓦納;A.B.馬海洛娃-克羅莫瓦;G.唐;E.王 | 申請（專利權）人： | 肯塔基大學研究基金會 |
| 主分類號： | C12N15/82 | 分類號： | C12N15/82 |
| 代理公司： | 中國專利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 李唐;黃希貴 |
| 地址： | 美國肯*** | 國省代碼： | 美國;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 煙草植物 煙草細胞 培養物 合成基因 蔗糖酯 二萜 繁殖材料 煙草產品 修飾 煙草 收獲 加工 | ||
1.增加煙草植物或其部分或煙草細胞培養物中的蔗糖酯含量的方法，所述方法包括通過抑制二萜合成基因的活性或表達來修飾所述煙草植物或煙草細胞培養物。
2.二萜合成基因用于增加煙草植物或其部分或煙草細胞培養物中的蔗糖酯含量的用途。
3.用于生產具有增加的蔗糖酯含量的煙草植物或其部分、煙草植物繁殖材料、煙葉、切割收獲的煙葉、加工的煙葉或切割并加工的煙葉或煙草細胞培養物的方法，所述方法包括修飾所述煙草以抑制二萜合成基因的活性或表達。
4.根據前述權利要求中任一項所述的方法或用途，其中與未經修飾以抑制二萜合成基因的活性或表達的煙草植物或煙草細胞培養物相比，蔗糖酯含量增加。
5.煙草植物或其部分或煙草細胞培養物，與未修飾的植物或未修飾的煙草細胞培養物相比，其經修飾以實現蔗糖酯含量的增加，其中所述修飾是二萜合成基因的活性或表達的抑制。
6.可從根據權利要求5所述的煙草植物或煙草細胞培養物獲得的煙草植物繁殖材料(例如，植物種子)。
7.根據權利要求1-4中任一項所述的方法或用途、根據權利要求5所述的煙草植物或煙草細胞培養物或根據權利要求6所述的煙草植物繁殖材料，其中所述二萜合成基因是環化酶2基因(CYC2)、CBTol環化酶或萜烯合酶3-8。
8.根據權利要求1-4或7中任一項所述的方法或用途、根據權利要求5或7所述的煙草植物或其部分或煙草細胞培養物或根據權利要求6或7所述的煙草植物繁殖材料，其中使用RNA干擾(RNAi)抑制二萜合成基因的表達。
9.根據權利要求8所述的方法、用途、煙草植物或煙草植物繁殖材料或煙草細胞培養物，其中使用包含環化酶2基因(CYC2)的外顯子1的至少部分、外顯子2的至少部分和外顯子3的至少部分的ddRNAi DNA構建體抑制環化酶2基因(CYC2)表達。
10.根據權利要求8所述的方法、用途、煙草植物或煙草植物繁殖材料或煙草細胞培養物，其中使用包含CBTol環化酶基因的外顯子4的至少部分、內含子4、外顯子5、內含子5、外顯子6、內含子6和外顯子7的至少部分的ddRNAi DNA構建體抑制CBTol環化酶基因表達。
11.根據權利要求8所述的方法、用途、煙草植物或煙草植物繁殖材料或煙草細胞培養物，其中使用包含萜烯合酶3-8基因的至少核苷酸1497至1517的ddRNAi DNA構建體抑制萜烯合酶3-8基因表達，其中編號通過與SEQ ID No.3比對來確定。
12.根據權利要求8所述的方法、用途、煙草植物或煙草植物繁殖材料或煙草細胞培養物，其中使用包含萜烯合酶3-8基因的至少核苷酸884至904的ddRNAi DNA構建體抑制萜烯合酶3-8基因表達，其中編號通過與SEQ ID No.3比對來確定。
13.根據權利要求1-4或7-12中任一項所述的方法或用途或根據權利要求5或7-12中任一項所述的煙草植物或其部分或煙草細胞培養物，其中與未經修飾以抑制二萜合成基因的活性或表達的煙草植物或煙草細胞培養物相比，在修飾的煙草植物或煙草細胞培養物中的煙草植物的蔗糖酯含量為至少2倍。
14.根據權利要求5或7-13中任一項所述的煙草植物或其部分用于培育煙草植物的用途。
15.根據權利要求5或7-13中任一項所述的煙草植物或其部分或煙草細胞培養物用于生產煙草工業產品的用途。
16.根據權利要求5或7-13中任一項所述的煙草植物或其部分用于生長作物的用途。
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