[發明專利]生物體物質的檢測方法、該方法中使用的化學發光指示劑在審
| 申請號： | 201880008839.6 | 申請日： | 2018-01-26 |
| 公開（公告）號： | CN110226087A | 公開（公告）日： | 2019-09-10 |
| 發明（設計）人： | 永井健治;新井由之 | 申請（專利權）人： | 國立大學法人大阪大學 |
| 主分類號： | G01N21/78 | 分類號： | G01N21/78;G01N21/64;G01N33/53;G01N33/542 |
| 代理公司： | 北京匯思誠業知識產權代理有限公司 11444 | 代理人： | 龔敏;王剛 |
| 地址： | 日本國大阪*** | 國省代碼： | 日本;JP |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 蛋白質 生物體物質 化學發光 自體熒光 熒光 檢測 共振能量轉移 定量測定 發光能量 融合蛋白 指示劑 種檢測 底物 發光 激發 融合 觀察 | ||
1.一種檢測方法，其為試樣中的生物體物質的檢測方法，其包含：
向所述試樣中混合融合蛋白(C)、及化學發光蛋白質(B)的底物，所述融合蛋白(C)為使可結合生物體物質的蛋白質(A)與化學發光蛋白質(B)融合成的融合蛋白(C)；以及
觀察來自所述試樣的發光信號，
所述蛋白質(A)與所述蛋白質(B)以可進行共振能量轉移的方式連接，
所述蛋白質(A)為在結合有所述生物體物質的狀態下可發出熒光的蛋白質(A1)、或可結合作為自體熒光分子的生物體物質的蛋白質(A2)，
所述蛋白質(B)可以利用其發光能量激發所述蛋白質(A)的熒光或自體熒光。
2.根據權利要求1所述的檢測方法，其中，
所述蛋白質(A1)為在結合有膽紅素的狀態下可發出熒光的UnaG蛋白或其變異體，
檢測對象的生物體物質為膽紅素。
3.根據權利要求1所述的檢測方法，其中，
所述蛋白質(A1)為在結合有膽綠素的狀態下可發出熒光的、選自由IFP、iRFP、smURFP、及它們的變異體構成的組中的蛋白質，
檢測對象的生物體物質為膽綠素。
4.根據權利要求1所述的檢測方法，其中，
所述蛋白質(A2)為可結合黃素單核苷酸的、選自由FbFP、iLOV蛋白、mini-SOG蛋白、及它們的變異體構成的組中的蛋白質，
檢測對象的生物體物質為黃素單核苷酸。
5.一種化學發光指示劑，其含有融合蛋白(C)，所述融合蛋白(C)為使可結合生物體物質的蛋白質(A)與化學發光蛋白質(B)融合成的融合蛋白(C)，其中，
所述蛋白質(A)與所述蛋白質(B)以可進行共振能量轉移的方式連接，
所述蛋白質(A)為在結合有所述生物體物質的狀態下可發出熒光的蛋白質(A1)、或可結合作為自體熒光分子的生物體物質的蛋白質(A2)，
所述蛋白質(B)可以利用其發光能量激發所述蛋白質(A)的熒光或自體熒光。
6.根據權利要求5所述的化學發光指示劑，其中，所述化學發光指示劑用于權利要求1～4中任一項所述的檢測方法。
7.一種載體或轉化體，其可表達權利要求1～4中任一項所規定的融合蛋白(C)。
8.一種試樣中的生物體物質的濃度判別方法，其包含：基于用權利要求1～4中任一項所述的檢測方法得到的發光信號數據，判別試樣中的生物體物質的濃度。
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