[實(shí)用新型]PCR擴(kuò)增光學(xué)模擬器

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201822163822.8
• 申請(qǐng)日: 2018-12-24
• 公開（公告）號(hào): CN209481678U
• 公開（公告）日: 2019-10-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 崔宏恩;張超;姚紹衛(wèi)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇省計(jì)量科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): C12M1/38
• 分類號(hào): C12M1/38;C12M1/34
• 代理公司: 南京正聯(lián)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32243
• 代理人: 王素琴

本實(shí)用新型提供一種PCR擴(kuò)增光學(xué)模擬器，用于實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的計(jì)量校準(zhǔn)，模擬器包括多個(gè)溫度傳感器、多個(gè)光學(xué)校準(zhǔn)單元和控制電路，光學(xué)校準(zhǔn)單元包括相鄰偶聯(lián)的一個(gè)溫度傳感器和一個(gè)發(fā)射光發(fā)生器，控制電路基于溫度傳感器監(jiān)測的溫度信號(hào)控制發(fā)射光發(fā)生器的發(fā)射光強(qiáng)度變化；代替核酸樣品作為實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀校準(zhǔn)介質(zhì)，其性能穩(wěn)定可靠，校準(zhǔn)操作中不需要配制PCR反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液和相關(guān)耗材，使用成本低，可獲得與核酸樣品類似的校準(zhǔn)結(jié)果，可實(shí)現(xiàn)C_t值參數(shù)和溫度參數(shù)的同步校準(zhǔn)，節(jié)省校準(zhǔn)時(shí)間，適用面比較廣。

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型屬于實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀質(zhì)量控制領(lǐng)域，特別是作為標(biāo)準(zhǔn)器用于實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的計(jì)量校準(zhǔn)。

背景技術(shù)

實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（real-time fluorescent quantitative PCR，RTFQ-PCR）是在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)（Polymerase Chain Reaction，PCR）基礎(chǔ)上發(fā)展而來，是一種采用新的核酸定量技術(shù)，即在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的儀器。

目前實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的校準(zhǔn)依據(jù)JJF 1527-2015《聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準(zhǔn)規(guī)范》采用已知濃度質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或核糖核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和溫度傳感器進(jìn)行，這種方法與實(shí)際熒光定量PCR儀擴(kuò)增過程保持一致，可以獲得較好的校準(zhǔn)結(jié)果，但仍存在以下問題，主要是配制PCR反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液程序復(fù)雜，且溫度系統(tǒng)的校準(zhǔn)不能與樣本示值誤差和樣本線性的校準(zhǔn)同步進(jìn)行；雖然行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY/T 1173-2010《聚合酶鏈反應(yīng)分析儀》提供了光學(xué)系統(tǒng)熒光檢測精密度和熒光線性的檢測方法，但是光學(xué)系統(tǒng)核心參數(shù)C_t值的校準(zhǔn)不完善。

實(shí)用新型內(nèi)容

本實(shí)用新型的目的是提供一種PCR擴(kuò)增光學(xué)模擬器，采用基于發(fā)射光發(fā)生器和溫度傳感器的整合來模擬實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增過程中溫度變化伴隨熒光強(qiáng)度的增強(qiáng)來校準(zhǔn)實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的C_t值參數(shù)和溫度參數(shù)；解決配制PCR反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液程序復(fù)雜，且溫度系統(tǒng)的校準(zhǔn)不能與樣本示值誤差和樣本線性校準(zhǔn)同步進(jìn)行的問題，及光學(xué)系統(tǒng)核心參數(shù)C_t值的校準(zhǔn)很不完善的問題。

為了實(shí)現(xiàn)上述目，本實(shí)用新型的技術(shù)方案是提供一種PCR擴(kuò)增光學(xué)模擬器，用于實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的計(jì)量校準(zhǔn)，模擬器包括多個(gè)溫度傳感器、多個(gè)光學(xué)校準(zhǔn)單元和控制電路，光學(xué)校準(zhǔn)單元包括相鄰偶聯(lián)的一個(gè)溫度傳感器和一個(gè)發(fā)射光發(fā)生器，控制電路基于溫度傳感器監(jiān)測的溫度信號(hào)控制發(fā)射光發(fā)生器的發(fā)射光強(qiáng)度變化。

模擬器還包括框架，框架的頂部設(shè)置有通道孔，底部設(shè)置有突起，通道孔和突起上下位置對(duì)應(yīng)，突起適配插入實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的樣品孔中，每個(gè)突起內(nèi)設(shè)置有一個(gè)溫度傳感器或一個(gè)發(fā)射光發(fā)生器，控制電路設(shè)置在框架上。

模擬器還包括蓋子，蓋子設(shè)置在框架的頂部，蓋子設(shè)置有和通道孔對(duì)應(yīng)的開口。

模擬器還包括多個(gè)發(fā)射光濾波器，發(fā)射光濾波器設(shè)置在對(duì)應(yīng)有發(fā)射光發(fā)生器的蓋子開口中。

所述控制電路包括控制電路A和控制電路B，控制電路A監(jiān)測存儲(chǔ)多個(gè)溫度傳感器數(shù)據(jù)，控制電路B根據(jù)多個(gè)溫度傳感器監(jiān)測到的溫度變化驅(qū)動(dòng)多個(gè)發(fā)射光發(fā)生器的發(fā)射光強(qiáng)度變化。

突起為圓柱形或圓錐形，突起長度為5mm-50mm，突起的最大外徑為1.5mm-15mm。

控制電路包括依次信號(hào)控制連接的微控制器、數(shù)模轉(zhuǎn)換模塊、可控恒流源芯片和LED發(fā)光源。