[實用新型]帶有微陣列固定化pH梯度柱的等電聚焦電泳芯片

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201820840614.4
• 申請日: 2018-06-01
• 公開（公告）號: CN208334265U
• 公開（公告）日: 2019-01-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 曹成喜;李國慶;王宇興;李紅根;孔凡志;劉小平;張強(qiáng);肖華
• 申請（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)
• 主分類號: G01N27/447
• 分類號: G01N27/447
• 代理公司: 上海交達(dá)專利事務(wù)所 31201
• 代理人: 王毓理;王錫麟

一種帶有微陣列固定化pH梯度柱的等電聚焦電泳芯片，包括：由上而下依次設(shè)置的微陣列支架、微電泳槽、電極以及微陣列透光窗口，其中：微陣列支架的底部設(shè)有陣列排布的若干個微陣列微柱對，每個微陣列微柱對的末端設(shè)有微型pH梯度柱。微型pH梯度柱包括：位于微陣列支架底部的微型pH梯度膠和微型支持膜，pH梯度膠朝下便于微陣列pH梯度柱樣本進(jìn)樣，微型pH梯度柱通過微陣列支架和自身重力與電極充分接觸以組成電泳回路。有效避免了傳統(tǒng)IPG聚焦電泳復(fù)雜的操作，提高了IEF分離分析上樣速度，加速了聚焦速度，尤其是能夠直接在線檢測。同時，與毛細(xì)管/芯片聚焦電泳技術(shù)相比，本實用新型的pH梯度柱具有穩(wěn)定性好、通量高、聚焦蛋白條帶可顯微切割回收等特殊優(yōu)點。

技術(shù)領(lǐng)域

本實用新型涉及的是一種生物檢測領(lǐng)域的技術(shù)，具體是一種帶有微陣列固定化pH梯度柱(IPG)的等電聚焦電泳芯片。

背景技術(shù)

等電聚焦電泳(isoelectric focusing,IEF)是在電場中產(chǎn)生連續(xù)pH梯度，上樣的蛋白質(zhì)依據(jù)其等電點(isoelectric point，pI)不同在IEF電場中實現(xiàn)聚焦分離分析。常見的為基于固定化pH梯度膠條(immobilized pH gradient，IPG strip)等電聚焦電泳通過在70～240mm長基片上通過化學(xué)鍵合IPG形成預(yù)制的pH梯度，進(jìn)而通過聚焦電泳實現(xiàn)蛋白多肽的分離分析。這種長基片等電聚焦電泳技術(shù)具有穩(wěn)定性好分辨率高等優(yōu)點，但明顯存在以下弊端：手工蛋白樣本進(jìn)樣繁瑣(10多步)，上樣水化時間長(大于10小時)，聚焦速度慢(5-10小時)，以及冗長的蛋白固定染色成像分析(大于7小時)等。

實用新型內(nèi)容

針對以上存在的問題，本實用新型提出一種帶有微陣列固定化pH梯度柱的等電聚焦電泳芯片，擯棄了傳統(tǒng)固定化pH梯度聚焦電泳和現(xiàn)有毛細(xì)管/芯片聚焦電泳的弊端，結(jié)合了二者的聚焦電泳技術(shù)優(yōu)點，不僅很好地解決了傳統(tǒng)固定化pH梯度聚焦電泳的四個弊端，而且較好地解決了上述毛細(xì)管/芯片聚焦技術(shù)的三個一直未得到解決的技術(shù)問題：低通量，樣本難以回收，天然梯度引起的等電聚焦不穩(wěn)定。

本實用新型是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

本實用新型涉及一種帶有微陣列固定化pH梯度柱的等電聚焦電泳芯片，包括：由上而下依次設(shè)置的微陣列支架、微電泳槽、電極絲以及微陣列透光狹窗，其中：微陣列支架的底部設(shè)有微陣列pH梯度柱，該微陣列pH梯度柱包括：陣列排布的若干個微陣列微柱對，每個微陣列微柱對的末端設(shè)有微型pH梯度柱，微型pH梯度柱通過微陣列支架和自身重力與電極充分接觸以組成電泳回路。

所述的微型pH梯度柱包括：位于末端的微型pH梯度膠和微型支持膜，其中：pH梯度膠朝下便于微陣列pH梯度柱樣本進(jìn)樣。

所述的微型pH梯度柱具有正負(fù)極性，且其正負(fù)極極性與微陣列支架極性一致。

所述的微陣列透光狹窗通過密封框架嵌合于微電泳槽底部，且微陣列透光狹窗與微陣列 pH梯度柱的排布方向一致。

所述的微陣列透光狹窗包括透明板與微陣列遮光膜。

所述的電極包括：陽極電極絲和陰極電極絲。

所述的陣列排布是指：由12～24根微型pH梯度柱組成單一陳列pH梯度柱單元，1～8 個單一陳列pH梯度柱單元構(gòu)成微陣列pH梯度柱陣，可以實現(xiàn)12～192根微型pH梯度柱同時水化進(jìn)樣及進(jìn)行多達(dá)192種不同樣本測試。

技術(shù)效果