[實用新型]一種抗繆勒管激素免疫層析定量檢測試紙條

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201820492323.0
• 申請日: 2018-04-08
• 公開（公告）號: CN208580108U
• 公開（公告）日: 2019-03-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 宋建勛;王小明;夏坤;盧艷華;佟順剛
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州天寶頌原生物科技開發(fā)有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/558;G01N33/533
• 代理公司: 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44205
• 代理人: 譚英強

本實用新型公開了一種抗繆勒管激素免疫層析定量檢測試紙條，包括PVC底板、樣品墊、熒光標(biāo)記物結(jié)合墊、硝酸纖維素和吸水墊；所述試紙條由樣品墊、熒光標(biāo)記物結(jié)合墊、硝酸纖維素、吸水墊依次搭接粘貼在PVC底板上構(gòu)成。所述熒光標(biāo)記物結(jié)合墊上固定有生物素標(biāo)記的抗繆勒管激素單克隆抗體和鏈霉親和素標(biāo)記的熒光蛋白；所述硝酸纖維膜上有檢測線和質(zhì)控線，檢測線包被抗繆勒管激素單克隆抗體，其與上述生物素標(biāo)記的抗繆勒管激素單克隆抗體具有不同的識別表位。本實用新型與目前常見的檢測抗繆勒管激素的方法相比，如：化學(xué)發(fā)光法/酶聯(lián)免疫吸附法，不僅大大縮短了檢測時間，同時還提高了檢測靈敏度。

技術(shù)領(lǐng)域

本實用新型屬于免疫檢測領(lǐng)域，具體涉及一種高靈敏度抗繆勒管激素免疫層析定量檢測試紙條。

背景技術(shù)

抗繆勒管激素(Anti-Mullerian hormone，AMH)是由兩個相同的70kD亞基組成的二聚糖蛋白，相對分子質(zhì)量為140kD，屬蛋白質(zhì)激素轉(zhuǎn)化生長因子B(TGF－β)超家族成員之一。抗繆勒管激素在性腺器官發(fā)育過程中起重要作用，在男性中，AMH主要由睪丸間質(zhì)細(xì)胞生成，在胚胎發(fā)育期間，其生理功能是抑制雄性繆勒管的發(fā)育，參與睪丸的分化和發(fā)育。在女性中，AMH由卵泡顆粒細(xì)胞生成，在女性生殖系統(tǒng)發(fā)育過程中，AMH抑制卵巢顆粒細(xì)胞上黃體生成素受體及黃體酮的生物合成和調(diào)節(jié)卵子的發(fā)生及細(xì)胞的減數(shù)分裂，女性隨著年齡增加，卵巢功能下降，血清AMH水平也逐漸下降。

研究發(fā)現(xiàn)，抗繆勒管激素參與女性卵巢功能調(diào)節(jié)，調(diào)控卵泡生長與發(fā)育，AMH水平與卵巢儲備功能呈正相關(guān)性，因此AMH可以作為女性卵巢功能評價的標(biāo)志物。傳統(tǒng)的卵巢功能評估主要以濾泡刺激激素(FSH)、抑制素B(INHB)、雌激素(E2)、年齡及竇卵泡數(shù)目(AFC)等作為指標(biāo)，單一指標(biāo)無法真實反映卵巢狀況。AMH作為一種新型的評估女性卵巢功能的指標(biāo)，相較于傳統(tǒng)方法，具有以下優(yōu)點：(1)隨著年齡增長或卵巢功能開始衰退，早于FSH、INHB、E2出現(xiàn)變化，更早更靈敏體現(xiàn)卵巢功能變化；(2)不受垂體促激素與經(jīng)期的影響，整個經(jīng)期周期數(shù)值變化不大；(3)可用于預(yù)測體外受精聯(lián)合胚胎移植術(shù)(IVF)的卵巢反應(yīng)性、預(yù)防卵巢過度刺激綜合癥(OHSS)、多囊卵巢綜合征(PCOS)的診斷。

目前國內(nèi)外臨床上檢測AMH的常用方法有酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、電化學(xué)發(fā)光法和化學(xué)發(fā)光法。其中ELISA方法耗時長、靈敏度低、背景值高、易造成假陽性和假陰性結(jié)果，并且需要專業(yè)人員進(jìn)行操作。電化學(xué)發(fā)光法和化學(xué)發(fā)光法如羅氏的ELECSYS AMH檢測儀目前逐漸替換ELISA法，但價格昂貴，不適合單人份和小批量檢測用，加上需要專門的儀器使用人員，維修和檢測成本均較高，不適合大范圍推廣使用。目前國內(nèi)檢測AMH的產(chǎn)品較少，產(chǎn)品性能存在差異，因此，臨床上迫切需要建立一種快速、便捷、準(zhǔn)確的AMH檢測產(chǎn)品。

生物素-親和素系統(tǒng)(biotinavidin system,BAS)，是一種醫(yī)學(xué)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的生物反應(yīng)放大系統(tǒng)。大量研究表明，BAS幾乎可與目前研究成功的各種標(biāo)記物結(jié)合。將該系統(tǒng)應(yīng)用于免疫組化，酶聯(lián)免疫，熒光免疫，放射免疫等檢測技術(shù)中，可顯著地提高以上技術(shù)方法的敏感性、特異性和穩(wěn)定性，有助于臨床快速診斷，并利于進(jìn)行大規(guī)模流行病學(xué)調(diào)查，成為研究免疫反應(yīng)的有力工具。由于BAS檢測系統(tǒng)經(jīng)濟快速，又無放射物質(zhì)污染，不需復(fù)雜儀器，具有巨大潛力和應(yīng)用的可能性。

生物素-親和素系統(tǒng)檢測原理：生物素經(jīng)化學(xué)修飾后可成為帶有多種活性基團的衍生物--活化生物素，活化生物素可以在蛋白質(zhì)交聯(lián)劑的介導(dǎo)下，與已知的幾乎所有生物大分子偶聯(lián)，包括蛋白質(zhì)，核酸，多糖，脂類等。親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白，對生物素有非常高的親和力，親和常數(shù)(K)為10mol/L，兩者結(jié)合穩(wěn)定性好專一性強。這樣，結(jié)合了熒光物質(zhì)的親和素分子與結(jié)合有特異性抗體的生物素分子產(chǎn)生反應(yīng)，起到了多級放大作用，通過對熒光物質(zhì)的激發(fā)而發(fā)射特定熒光信號，達(dá)到檢測未知抗原(或抗體)分子的目的。鏈霉親和素是與親和素有相似生物學(xué)特性的一種蛋白質(zhì)，鏈霉親和素與親和素一樣分子中每條肽鏈都能結(jié)合一個生物素，因幾乎所有用于標(biāo)記的物質(zhì)均可以同親和素或鏈霉親合素結(jié)合。利用生物素-親和素系統(tǒng)研制抗繆勒管激素檢測試快速診斷試劑尚無報道。