[實(shí)用新型]一種新城疫病毒熒光RT?PCR檢測(cè)試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201820042399.3
• 申請(qǐng)日: 2018-01-11
• 公開（公告）號(hào): CN207159201U
• 公開（公告）日: 2018-03-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 夏建平
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東博思源生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12M1/00
• 分類號(hào): C12M1/00;C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/93
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及一種試劑盒，具體涉及一種新城疫病毒熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒，屬于生物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

新城疫也稱亞洲雞瘟，是由新城疫病毒引起的一種主要侵害雞、野禽、鵝及部分鳥類的急性、高度傳染性、致死性疾病，給養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)安全造成嚴(yán)重危害；新城疫是由新城疫病毒感染所引起的，病原體為新城疫病毒；新城疫病毒在病毒分類學(xué)中的位置屬于副黏病毒科（Paramyxoviridae）、副黏病毒亞科（Paramyxovirinae）、禽腮腺炎病毒屬（Avulavirus）；典型的新城疫屬于嗜呼吸道型，發(fā)病急、傳播快，典型特征為引口喘氣、呼吸困難，常發(fā)出喘鳴聲或伴隨尖銳叫聲，雞冠發(fā)紅發(fā)紫，常窒息而死；嗜消化道型，口流黏涎、嗉囊積液或積氣、腹瀉或下痢，顏色一般為黃綠色，味惡臭，頭頸部羽毛逆立，常伴隨呻吟氣喘或輕度咳嗽；嗜神經(jīng)型，精神沉郁、反應(yīng)遲鈍，陣發(fā)性轉(zhuǎn)圈或向后運(yùn)動(dòng)，有時(shí)呈現(xiàn)有規(guī)律的震顫，應(yīng)激時(shí)癲癇樣發(fā)作，瀕死前伸腿側(cè)臥或腿陣發(fā)性抖動(dòng)，有時(shí)頭頸扭曲、角弓反張；混合型即以上癥狀在雞群中混合出現(xiàn)，發(fā)病時(shí)間較長(zhǎng)，危害較大。

PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) )技術(shù)已廣泛應(yīng)用于動(dòng)物疫病檢測(cè)，該技術(shù)主要是基于病原微生物核酸的特異性，針對(duì)靶標(biāo)設(shè)計(jì)特異性引物對(duì)DNA或RNA片段進(jìn)行指數(shù)擴(kuò)增；實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)由傳統(tǒng)PCR技術(shù)發(fā)展而來(lái)，實(shí)時(shí)熒光PCR在反應(yīng)體系中加入標(biāo)記熒光基團(tuán)的探針，在PCR指數(shù)擴(kuò)增期間通過(guò)連續(xù)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)出現(xiàn)的先后順序來(lái)即時(shí)分析DNA或RNA樣本的拷貝數(shù)；實(shí)時(shí)熒光PCR與傳統(tǒng)PCR法相比，一方面加入的TaqMan探針在反應(yīng)中只與模板的特異序列結(jié)合，不進(jìn)行延伸，減少錯(cuò)配，提高檢測(cè)準(zhǔn)確性和特異性；另一方面實(shí)時(shí)熒光PCR在封閉的體系中進(jìn)行擴(kuò)增和實(shí)時(shí)檢測(cè)，無(wú)需電泳就可以對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，避免了傳統(tǒng)PCR產(chǎn)物的污染，自動(dòng)化程度高，重復(fù)性好，檢測(cè)周期短，廣泛應(yīng)用于科研和臨床檢測(cè)；因此，應(yīng)用熒光PCR技術(shù)建立新城疫病毒檢測(cè)方法對(duì)于快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)新城疫病毒具有重要的意義。

實(shí)用新型內(nèi)容

為解決上述問(wèn)題，本實(shí)用新型提出了一種新城疫病毒熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒，能夠快速、準(zhǔn)確的區(qū)分新城疫病毒毒株，并能對(duì)新城疫病毒含量做出準(zhǔn)確檢測(cè)；能夠更快更全面地了解新城疫的發(fā)病情況，提高新城疫的診斷效率，并提出相應(yīng)的防控措施，減少不必要的經(jīng)濟(jì)損失。

本實(shí)用新型的新城疫病毒熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒，包括盒體；所述盒體上蓋設(shè)有盒蓋；所述盒體內(nèi)設(shè)置有減震海綿；所述減震海綿上開設(shè)有多個(gè)固定位；所述減震海綿上壓設(shè)有一標(biāo)識(shí)卡；所述標(biāo)識(shí)卡上開設(shè)有多個(gè)與固定位正對(duì)設(shè)置的限位孔；每一所述固定位中分別擺放有一試劑管；每一所述限位孔外側(cè)上方分別設(shè)置有用于標(biāo)注區(qū)別不同試劑管的試劑標(biāo)識(shí)，便于拿取不同試劑，提高檢測(cè)效率；所述試劑管包括裝有新城疫病毒RT-PCR反應(yīng)液的第一試劑管、裝有酶混合液的第二試劑管、裝有陰性質(zhì)控品的第三試劑管、裝有新城疫病毒陽(yáng)性質(zhì)控品的第四試劑管、裝有滅菌DEPC水的第五試劑管及裝有ROX校正液第六試劑管。

進(jìn)一步地，所述減震海綿上的固定位設(shè)置有3行，2列，每行2個(gè)固定孔，每列3個(gè)固定孔；

所述第一試劑管放置于減震海綿上的第一行、第一列的所述定位孔中；

所述第二試劑管放置于減震海綿上的第一行、第二列的所述定位孔中；

所述第三試劑管放置于減震海綿上的第二行、第一列的所述定位孔中；

所述第四試劑管放置于減震海綿上的第二行、第二列的所述定位孔中；

所述第五試劑管放置于減震海綿上的第三行、第一列的所述定位孔中；

所述第六試劑管放置于減震海綿上的第三行、第二列的所述定位孔中。

進(jìn)一步地，所述第二試劑管內(nèi)裝有逆轉(zhuǎn)錄酶和擴(kuò)增酶。

作為優(yōu)選的實(shí)施方案，所述試劑管為滅菌的螺口凍存管。

本實(shí)用新型與現(xiàn)有技術(shù)相比較，本實(shí)用新型的新城疫病毒熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒，能夠快速、準(zhǔn)確的區(qū)分新城疫病毒毒株，并能對(duì)新城疫病毒含量做出準(zhǔn)確檢測(cè)；能夠更快更全面地了解新城疫的發(fā)病情況，提高新城疫的診斷效率，并提出相應(yīng)的防控措施，減少不必要的經(jīng)濟(jì)損失。

附圖說(shuō)明

圖1是本實(shí)用新型的整體結(jié)構(gòu)示意圖。

圖2是本實(shí)用新型的的新城疫病毒熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒的靈敏度檢測(cè)結(jié)果示意圖。

附圖中各部件標(biāo)注為：1-盒體，2-盒蓋，3-減震海綿，5-標(biāo)識(shí)卡，6-限位孔，7-試劑標(biāo)識(shí)，8-第一試劑管，9-第二試劑管，10-第三試劑管，11-第四試劑管，12-第五試劑管，13-第六試劑管。

具體實(shí)施方式