[實用新型]克羅諾桿菌快速檢測用系統(tǒng)

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201820007728.0
• 申請日: 2018-01-03
• 公開（公告）號: CN208580106U
• 公開（公告）日: 2019-03-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李靜雯;杜美紅;劉清珺;趙瑞雪;萬宇平;吳小勝;馮月君
• 申請（專利權(quán)）人: 北京市理化分析測試中心;北京勤邦生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/535
• 代理公司: 北京潤平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11283
• 代理人: 嚴(yán)政;劉依云

本實用新型涉及微生物檢測領(lǐng)域，公開了一種克羅諾桿菌快速檢測系統(tǒng)，該系統(tǒng)包括試劑盒和磁力分離設(shè)備，其中磁力分離設(shè)備包括微孔板用磁力架和/或離心管用磁力架，試劑盒包括盒體和固定板。所述固定板固定于盒體底部，且設(shè)置有至少7個容器孔；各容器孔內(nèi)分別放置有免疫捕獲劑容器、檢測抗體容器、化學(xué)發(fā)光A液容器、化學(xué)發(fā)光B液容器、樣品前處理液容器、洗滌液容器和增菌液容器；所述容器孔的大小與各容器的大小相匹配，所述盒體的形狀為長方體。使用本實用新型的試劑盒和系統(tǒng)對食品、藥品或環(huán)境樣品中的克羅諾桿菌進(jìn)行檢測時，可以在10小時內(nèi)準(zhǔn)確檢測出食品、藥品、環(huán)境等樣品中10^?1CFU/g(或mL)的克羅諾桿菌。

技術(shù)領(lǐng)域

本實用新型涉及微生物檢測領(lǐng)域，具體地，涉及一種克羅諾桿菌 (Cronobacter)快速檢測用系統(tǒng)。

背景技術(shù)

克羅諾桿菌屬是一類條件致病菌，包括阪崎克羅諾桿菌(Cronobactersakazakii)、蘇黎世克羅諾桿菌、都柏林克羅諾桿菌、穆汀斯克克羅諾桿菌、丙二酸鹽陽性克羅諾桿菌等五種，可引起感染嬰幼兒，特別是早產(chǎn)兒、免疫力低下者，引起敗血癥、腦膜炎、壞死性小腸結(jié)腸炎等疾病。特別是腦膜炎可引發(fā)腦梗塞、腦膿腫和腦室腦炎等并發(fā)癥，患者常遺留有嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥。嬰幼兒、老年人或免疫低下人群感染克羅諾桿菌屬引發(fā)的疾病而招致的死亡率可達(dá)40-80％。所以我們國家標(biāo)準(zhǔn)對克羅諾桿菌屬采取零容忍態(tài)度，規(guī)定了嬰幼兒配方食品、乳和乳制品均需對該菌進(jìn)行檢測。

目前，我國國家標(biāo)準(zhǔn)中克羅諾桿菌屬的檢測需要經(jīng)過前增菌、選擇性增菌、分離培養(yǎng)、平板鑒定、生化鑒定等步驟，雖然結(jié)果較為準(zhǔn)確，成本較低，但檢測過程繁瑣，一般需要5-7天的時間獲得結(jié)果，不適合用于克羅諾桿菌的快速篩查與污染控制。以PCR為代表的分子生物學(xué)技術(shù)和以酶聯(lián)免疫為代表的免疫學(xué)檢測技術(shù)是公認(rèn)的致病菌快速檢測的發(fā)展方向。分子生物學(xué)技術(shù)以檢測微生物的核酸為特點(diǎn)，靈敏度高、特異性好，但對檢測體系、檢測環(huán)境要求嚴(yán)格，要求檢測人員有較高的專業(yè)背景，容易形成氣溶膠導(dǎo)致假陽性檢測結(jié)果；而且檢測儀器昂貴，限制了其在基層部門微生物快速檢測中的應(yīng)用。免疫分析技術(shù)以抗體特異性識別微生物細(xì)胞表面的抗原決定簇為特點(diǎn)，成本低廉、特異性好。但是上述方法仍存在靈敏度較低、可檢測范圍窄、檢測結(jié)果不穩(wěn)定易被干擾等問題。

食品中克羅諾桿菌的數(shù)量一般較少(小于10CFU/g)且占樣品中全部微生物的比例較小(一般小于1％，國家標(biāo)準(zhǔn)允許10³-10⁵CFU/g的非致病微生物存在于食品中)，所以不適合直接進(jìn)行檢測。因此，目前急需研發(fā)一種能夠快速檢測克羅諾桿菌且檢出限較低的克羅諾桿菌檢測用試劑盒。

實用新型內(nèi)容

本實用新型的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷，提供一種克羅諾桿菌(特別是阪崎克羅諾桿菌)快速檢測用系統(tǒng)。使用本實用新型提供的試劑盒和系統(tǒng)對食品或環(huán)境樣品中的克羅諾桿菌進(jìn)行檢測時，可以快速且準(zhǔn)確地檢測出樣品的克羅諾桿菌，同時檢出限較低。

為了實現(xiàn)上述目的，一方面，本實用新型提供了一種克羅諾桿菌快速檢測用試劑盒，該試劑盒包括盒體和固定板；所述固定板固定于所述盒體的底部，且所述固定板上設(shè)置有至少7個容器孔；各容器孔內(nèi)分別放置有免疫捕獲劑容器、檢測抗體容器、化學(xué)發(fā)光A液容器、化學(xué)發(fā)光B液容器、樣品前處理液容器、洗滌液容器和增菌液容器；所述容器孔的大小與各容器的大小相匹配。

優(yōu)選地，所述免疫捕獲劑容器的容積為1-3mL且裝有免疫捕獲劑，所述免疫捕獲劑含有免疫磁珠和保存液，所述免疫磁珠偶聯(lián)有能夠特異地與克羅諾桿菌結(jié)合的抗體。

優(yōu)選地，所述檢測抗體容器為容積為1-3mL的避光容器且裝有檢測抗體，所述檢測抗體為辣根過氧化物酶標(biāo)記的能夠特異地與克羅諾桿菌結(jié)合的抗體。

優(yōu)選地，所述化學(xué)發(fā)光A液容器為容積為5-10mL的避光容器且裝有化學(xué)發(fā)光A液，所述化學(xué)發(fā)光A液含有魯米諾和對咪唑基苯酚。