[發明專利]一種活性絲素蛋白生物組織工程支架的溶噴制備方法

有效

• 申請號: 201811654044.0
• 申請日: 2018-12-28
• 公開（公告）號: CN109529117B
• 公開（公告）日: 2023-01-24
• 發明（設計）人: 羅杰;張耀鵬;謝嘯鋒;呂悅光;林嘉棟;張敏;余明光
• 申請（專利權）人: 佛山科學技術學院
• 主分類號: D04H5/03
• 分類號: D04H5/03;A61L27/26;A61L27/54;A61L27/56;A61L27/58;D01D5/04;D01F4/02
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 謝泳祥

1.一種活性絲素蛋白生物組織工程支架的溶噴制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）以脫膠蠶絲為原料，在40℃水浴環境下，使用溶劑溶解脫膠蠶絲2~12 小時，得到絲素蛋白水溶液；

（2）將步驟（1）制得的絲素蛋白水溶液進行離心、過濾、透析和濃縮處理后，得到濃度為8~45%的絲素蛋白紡絲液；

（3）向步驟（2）中制得的絲素蛋白紡絲液中加入活性蛋白溶液，制得活性絲素蛋白紡絲液，所述活性蛋白溶液中的活性蛋白為免疫球蛋白、乳鐵蛋白、金屬硫蛋白、超氧化物歧化酶、大豆蛋白、溶菌酶中的任一種；所加活性蛋白溶液中的活性蛋白濃度為5~15%；

（4）將步驟（3）制得的活性絲素蛋白紡絲液，在溫度為0~37℃的高壓空氣噴射流為拉伸動力，進行溶噴紡絲，所用高壓空氣噴射流中的噴射壓力為10MPa~30MPa；所述的高壓空氣噴射流為經過干燥的壓縮空氣，其相對濕度為10%~50%；并用纖維接收器接收紡絲，并且在所述纖維接收器上設有乙醇噴霧裝置，所述乙醇噴霧裝置對紡絲進行后處理，實現紡絲纖維成型過程中絲素蛋白構象的轉變，制得纖維支架；所述乙醇噴霧裝置中的乙醇噴霧速度為100~1000mL/min，且所用乙醇濃度為50~100%；

（5）在纖維接收器之后設有細胞打印裝置，將含有種子細胞或細胞生長因子的活性溶液打印到步驟（4）中制得纖維支架中，最終制得活性絲素蛋白生物組織工程支架。

2.根據權利要求1所述的一種活性絲素蛋白生物組織工程支架的溶噴制備方法，其特征在于，所述溶解脫膠蠶絲的溶劑為LiBr水溶液或乙醇/CaCl₂水溶液。

3.根據權利要求1所述的一種活性絲素蛋白生物組織工程支架的溶噴制備方法，其特征在于，還包括以下步驟：對步驟（1）制得的絲素蛋白溶液加入pH值調節劑進行pH值調節，其添加的pH值調節劑為金屬離子或無機納米粉體。

4.根據權利要求3所述的一種活性絲素蛋白生物組織工程支架的溶噴制備方法，其特征在于，所述金屬離子為鈣離子、銀離子中的一種。

5.根據權利要求3 所述的一種活性絲素蛋白生物組織工程支架的溶噴制備方法，其特征在于，所述無機納米粉體為羥基磷灰石、磷酸三鈣中的一種。

6.根據權利要求1 所述的一種活性絲素蛋白生物組織工程支架的溶噴制備方法，其特征在于，所述纖維接收器為纖維接收平板或纖維接收滾筒；當所述纖維接收器采用的是纖維接收平板時，獲得活性絲素蛋白纖維膜；當所述纖維接收器采用的是纖維接收滾筒時，獲得單向拉伸且單方向有序排列的活性絲素蛋白連續長纖維膜。