[發明專利]一種通過熒光金納米簇探針檢測膽固醇及其濃度的方法、檢測膽固醇氧化酶及其濃度的方法

有效

• 申請號: 201811653122.5
• 申請日: 2018-12-30
• 公開（公告）號: CN109612973B
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發明（設計）人: 王思明;劉詩超;王偉楠;張巍;李曉華
• 申請（專利權）人: 長春中醫藥大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵

本發明提供了一種熒光金納米簇在熒光法檢測膽固醇和/或膽固醇氧化酶中的應用。本發明將熒光金納米簇探針用于檢測膽固醇和/或膽固醇氧化酶，具有靈敏度高，良好的選擇性，線性范圍較寬等特點。本發明建立的通過熒光納米簇發射熒光方法來檢測膽固醇，不僅避免了生物體其他因素的干擾，可以選擇性的檢測血液、尿液中膽固醇的濃度，可以無創地檢測膽固醇濃度；而且使用熒光發射的方法檢測膽固醇的濃度，而不是使用事先制備好的熒光金屬納米簇，最大限度地避免了實驗中的假信號可能帶來的干擾；同時檢測過程中同時生成的熒光金納米簇具有優良的熒光性質，在光學材料、生物醫學等領域上的應用具有重要的意義。

技術領域

本發明涉及膽固醇檢測技術領域，具體涉及一種熒光金納米簇在熒光法檢測膽固醇和/或膽固醇氧化酶中的應用、采用熒光金納米簇熒光法檢測膽固醇濃度的方法、采用熒光金納米簇熒光法檢測膽固醇氧化酶濃度的方法以及采用熒光金納米簇熒光法檢測樣品中是否含有膽固醇或膽固醇氧化酶的方法，尤其涉及一種熒光金納米簇在熒光法檢測膽固醇和/或膽固醇氧化酶中的應用、通過熒光金納米簇探針檢測膽固醇及其濃度的方法、通過熒光金納米簇探針檢測膽固醇氧化酶及其濃度的方法以及通過熒光金納米簇探針檢測樣品中是否含有膽固醇或膽固醇氧化酶的方法。

背景技術

近年來隨著科技的發展，熒光納米材料由于在量子尺寸效應、等離子共振效應及最子隧道效應等方麗的特性，展現出與眾不同的光學、化學、也學以及催化性能，使其在科學界備受關注。目前已研究發現的熒光納米材料主要有有機染料、碳量子點、聚合物點、半導體量子點、熒光金屬納米簇(FM NCs)等。這其中，金屬納米簇是一種特殊材料，在20世紀六十年代，已有研究者發現銅、銀、金等金屬有較弱的熒光，但其熒光產率特別低，隨著技術的發展和社會的需要，熒光金屬納米簇的研究越來越受科研工作者的關注。FM NCs是由保護劑同一些(幾個、數十個或者上百個)金屬原子，如(Cu、Ag、Au、Pt)結合而成的粒徑小于2nm的熒光納米材料。金屬納米簇的尺寸介于金屬原子和納米粒子之間，當金屬本體材料的尺寸降到納米級別甚至接近于電子費米水平，原來連續的能帶就會分裂成若干個分立能級，電子的運動將不再受空間的限制，而躍遷于各個能級之間；連續能級將被分裂成各種離散能級，從而使FM NCs具有獨特的較強熒光性能。這些分立能級導致了納米簇具有可調的激發，良好的水溶性，光穩定性和低毒性等特點。金屬粒子的物理化學性能與其尺寸大小密切相關，并對其有依賴性。目前，研究發現的熒光金屬納米簇已有多種，例如鉑納米簇、金納米簇、銀納米簇、銅納米簇以及各種合金納米簇等。

正是由于熒光金屬納米簇熒光強度較強，同生物分子具有良好的相容性且穩定性較好，而且合成方法較為簡單，使其在環境監測、生物成像、疾病監測、催化、光電學等多個領域具有廣闊的前景，特別是在生物小分子檢測領域具有很高的應用價值。

膽固醇又稱膽甾醇，一種環戊烷多氫菲的衍生物。膽固醇是動物組織細胞所不可缺少的重要物質，它不僅參與形成細胞膜，而且是合成膽汁酸，維生素D以及甾體激素的原料。同時膽固醇還是臨床生化檢查的一個重要指標，膽固醇濃度異常時將會引起許多疾病，會導致高膽固醇血癥，對機體產生不利的影響，現代研究已發現，動脈粥樣硬化、靜脈血栓形成與膽石癥與高膽固醇血癥有密切的相關性。因此，建立簡便、靈敏、準確的檢測分析膽固醇的方法是十分必要的。

目前，現有文獻中記載檢測膽固醇的方法有氣相色譜法、比色法、HDL-C檢測方法、膽固醇同位素稀釋液相色譜串聯質譜分析法等，這類方法一般需要大型儀器而且操作比較復雜，設備昂貴、耗時長、靈敏度低等缺點，難以滿足日常檢測要求，大大限制了這些檢測方法的推廣和應用，也增加了使用方的成本。

因此，如何找到一種更加合適的檢測膽固醇的方法，克服現有檢測膽固醇的方法存在的上述缺陷，已成為諸多具有前瞻性的研究人員廣為關注的焦點之一。

發明內容