[發明專利]METTL3基因的應用及其檢測方法

有效

• 申請號: 201811644223.6
• 申請日: 2018-12-30
• 公開（公告）號: CN109457029B
• 公開（公告）日: 2020-06-23
• 發明（設計）人: 徐棟花;王增艷;王萍萍;王增芳;徐洋;閆書山;王菁華
• 申請（專利權）人: 濰坊醫學院第一附屬醫院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/686;C12N15/11;A61K31/7088;A61P19/02;A61P29/00
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務所 32237
• 代理人: 楊文晰

本發明涉及一種m6A甲基化修飾過程中關鍵基因(METTL3)的檢測及其應用，根據提取的總RNA序列，設計并合成特異性PCR引物，利用real?time PCR技術，發現METTL3在類風濕關節炎患者外周血單個核細胞中的表達顯著上升，并且與類風濕關節炎的疾病活動性指標CRP、ESR呈明顯正相關關系，故METTL3基因可應用于制備類風濕關節炎的輔助診斷、治療或者預后評估的制劑；本發明同時設計并合成特異性過表達該基因的Lv?METTL3序列，能夠通過調控NF?κB信號通路顯著抑制巨噬細胞的增殖及LPS所誘導的巨噬細胞的炎癥反應，可成為類風濕關節炎的分子靶向治療工具。

技術領域

本發明屬于風濕病分子生物學領域，具體涉及一種m6A甲基化中關鍵基因METTL3的表達、應用及其檢測方法，具體而言，本發明具體涉及METTL3基因在制備類風濕關節炎輔助診斷制劑、分子靶向治療制劑或者預后評估制劑中的應用。

背景技術

類風濕關節炎(Rheumatoid Arthritis,RA)，是一種常見的病因未明的炎癥性、系統性自身免疫性疾病，以對稱性手足小關節慢性炎癥為主要臨床表現，其主要病理特征是滑膜炎和血管炎(Scott DL,et al.Rheumatoid arthritis.Lancet.2010；376:1094-108.)。RA通常會造成關節以外的臟器損傷，例如，肺組織纖維化、心包炎、皮膚出現類風濕結節等(Turesson C.Extra-articular rheumatoid arthritis.Curr OpinRheumatol.2013；25:360-366.)。RA具有高度的致畸性和致殘性，病程后期嚴重影響患者的生活品質。RA的發病機制不明，可能與傳染、遺傳、性激素分泌等有關(Glant TT,etal.Epigenetics in the pathogenesis of rheumatoid arthritis.BMC Med.2014；12:35；Salemi S,et al.Could early rheumatoid arthritis resolve afterperiodontitis treatment only？:case report and review of theliterature.Medicine(Baltimore)2014；93:e195；Ayeldeen G,et al.Possible use ofmiRNAs-146a and -499 expression and their polymorphisms as diagnostic markersfor rheumatoid arthritis.Mol Cell Biochem.2018；449:145-156.)。盡快緩解患者的炎性癥狀，緩解疼痛，控制病情活動，延緩疾病的進展，減少疾病對患者造成致畸以及致殘的傷害是RA治療的關鍵。但是，目前RA的治療藥物包括改變病情抗風濕藥、糖皮質激素等缺乏靶向性、針對性，長期服藥副作用大，病人身體及心理負擔重(Westhovens R,etal.Clinical efficacy and safety of abatacept in methotrexate-naive patientswith early rheumatoid arthritis and poor prognostic factors.Ann RheumDis.2009；68:1870-1877；Bathon J,et al.Sustained disease remission andinhibition of radiographic progression in methotrexate-naive patients withrheumatoid arthritis and poor prognostic factors treated with abatacept:2-year outcomes.Ann Rheum Dis 2011；70:1949-1956；Goekoop-Ruiterman YP,etal.Clinical and radiographic outcomes of four different treatment strategiesin patients with early rheumatoid arthritis(the BeSt study):A randomized,controlled trial.Arthritis Rheum 2008；58:S126-35；Goekoop-Ruiterman YP,etal.Comparison of treatment strategies in early rheumatoid arthritis:arandomized trial.Ann Intern Med 2007；146:406-415.)。因此，尋找RA早期診斷、靶向治療和預后評估的生物標記物分子意義深重。