[發明專利]一種水凝膠狀的細胞培養配方

在審

• 申請號: 201811643417.4
• 申請日: 2018-12-30
• 公開（公告）號: CN109628390A
• 公開（公告）日: 2019-04-16
• 發明（設計）人: 李杰;張維
• 申請（專利權）人: 深圳光彩生命工程技術有限公司
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775
• 代理公司: 深圳市鈞含知識產權代理有限公司 44290
• 代理人: 符立新

本發明涉及一種水凝膠狀的細胞培養配方，由以下原料組成：以DMEM培養液10?100mL為基礎，還含有棉籽糖2?4mL、葡萄糖2?4mL、胰島素0.05?0.1mL、轉鐵蛋白0.005?0.01mL、生長激素0.001?0.002mL、谷胱甘肽0.1?2.2mL、谷氨酰胺0.01?0.03mL、非必需氨基酸0.01?0.012mL、水凝膠6?8mL。相對現有技術，本發明通過對各種生長因子種類和多種組分和用量進行研究而獲得，以無血清方式實現了胎盤間充質干細胞體外培養；間充質干細胞能夠實現貼壁生長并有效地提高間充質干細胞的擴增能力，細胞生長因子由水凝膠被緩釋，持續為細胞培養提供各種生長因子種類和多種組分，保障細胞持續擴增能力。

技術領域

本發明涉及細胞培養技術領域，特別涉及一種水凝膠狀的細胞培養配方。

背景技術

目前，對臍帶間充質干細胞的培養體系主要應用含動物血清(如胎牛血清)的培養基，血清中含有細胞生長所需的生長因子、激素、載體蛋白、貼壁因子、微量元素以及其他營養物質，可以促進細胞生長，但含有血清的培養基存在攜帶病原體，利用動物血清培養的干細胞，其內部結構會發生何種變化尚未可知，為避免含動物血清培養中病毒等病原體污染和異種血清所致的過敏反應，目前有報道開發了不含有血清的培養基以培養干細胞，然而所得效果卻不甚理想。

發明內容

本發明的目的是提供一種水凝膠狀的細胞培養配方，所要解決的技術問題是：目前有報道開發了不含有血清的培養基以培養干細胞配方，但是效果不佳。

本發明解決上述技術問題的技術方案如下：一種水凝膠狀的細胞培養配方，由以下原料組成：以DMEM培養液10-100mL為基礎，還含有棉籽糖2-4mL、葡萄糖2-4mL、胰島素0.05-0.1mL、轉鐵蛋白0.005-0.01mL、生長激素0.001-0.002mL、谷胱甘肽0.1-2.2mL、谷氨酰胺0.01-0.03mL、非必需氨基酸0.01-0.012mL、水凝膠6-8mL。

進一步，由以下原料組成：以DMEM培養液10mL為基礎，還含有棉籽糖2mL、葡萄糖2mL、胰島素0.05mL、轉鐵蛋白0.005mL、生長激素0.001mL、谷胱甘肽0.1mL、谷氨酰胺0.01mL、非必需氨基酸0.01mL、水凝膠6mL。

進一步，由以下原料組成：以DMEM培養液100mL為基礎，還含有棉籽糖4mL、葡萄糖4mL、胰島素0.1mL、轉鐵蛋白0.01mL、生長激素0.002mL、谷胱甘肽2.2mL、谷氨酰胺0.03mL、非必需氨基酸0.012mL、水凝膠8mL。

進一步，由以下原料組成：以DMEM培養液55mL為基礎，還含有棉籽糖3mL、葡萄糖3mL、胰島素0.07mL、轉鐵蛋白0.008mL、生長激素0.0015mL、谷胱甘肽1.2mL、谷氨酰胺0.02mL、非必需氨基酸0.006mL、水凝膠7mL。

進一步，所述的非必需氨基酸由谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天門冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸、絲 氨酸和酪氨酸組成。

進一步，所述的水凝膠由熱交聯明膠制成。

進一步，所述水凝膠的含水率為75％以上且95％以下。

進一步，所述水凝膠的厚度為1μm以上且30mm以下。

本發明的有益效果是：通過對各種生長因子種類和多種組分和用量進行研究而獲得，以無血清方式實現了胎盤間充質干細胞體外培養；在此無血清培養基體系中，間充質干細胞能夠實現貼壁生長并有效地提高間充質干細胞的擴增能力，使得不含外源血清的培養體系更有利于干細胞被安全地應用于臨床移植；水凝膠作為各種生長因子種類和多種組分的載體，細胞生長因子由水凝膠被緩釋，持續為細胞培養提供各種生長因子種類和多種組分，保障細胞持續擴增能力。

具體實施方式

以下對本發明的原理和特征進行描述，所舉實例只用于解釋本發明，并非用于限定本發明的范圍。