[發明專利]乙醇作為增敏劑提高氨基糖苷類抗生素殺菌效率的方法

有效

• 申請號: 201811641533.2
• 申請日: 2018-12-29
• 公開（公告）號: CN109526956B
• 公開（公告）日: 2020-12-04
• 發明（設計）人: 付新苗;李中燕;張祖勤;高媛媛
• 申請（專利權）人: 福建師范大學
• 主分類號: A01N31/02
• 分類號: A01N31/02;A01N43/16;A01P1/00
• 代理公司: 福州君誠知識產權代理有限公司 35211
• 代理人: 戴雨君

本發明公開了乙醇作為增敏劑提高氨基糖苷類抗生素殺菌效率的方法。該方法是在含有待滅細菌的菌液中加入終濃度為20?30mM的乙醇，得到菌液預處理液，然后在所得菌液預處理液中加入氨基糖苷類抗生素，殺滅細菌。本發明方法可以大幅度提高氨基糖苷抗生素對革蘭氏陰性菌的殺菌效率，將有效降低病原菌產生耐藥的風險，同時在達到同樣治療效果的前提下，減少用藥量和給藥時間，從而降低其副作用。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及乙醇作為增敏劑提高氨基糖苷類抗生素殺菌效率的方法。

背景技術

細菌耐藥是全球面臨的重大公共健康問題。在中國，由于臨床抗生素濫用以及養殖業抗生素的濫用，使得細菌耐藥問題更為緊迫。提高現有抗生素的殺菌效率、快速高效殺滅病原菌是降低細菌耐藥風險的重要手段。

大腸桿菌是一種重要的寄生于人體腸道的細菌，特殊情況下會致病，例如血液感染。同時大腸桿菌作為生物學研究常用的標準菌株，廣泛用于細菌耐藥機理的研究。銅綠假單胞菌是一種條件致病菌，也是研究細菌耐藥機理的常用菌株，其本身耐受卡那霉素。大腸桿菌和銅綠假單胞菌都屬于革蘭氏陰性細菌。

氨基糖苷抗生素是目前治療需氧革蘭氏陰性桿菌嚴重感染的重要藥物，屬于殺菌型抗生素。因其分子結構有一個氨基環醇類和一個或多個氨基糖分子，并由配糖鍵連接成苷而得名。氨基糖苷抗生素與細菌核糖體30S小亞基結合，導致細菌合成錯誤的蛋白質，產生有害的蛋白質聚集體，最終殺死細菌。這類抗生素在臨床應用方面受到諸多限制，主要原因包括日益嚴重的細菌耐藥現象以及該類抗生素的腎毒性和耳毒性。目前臨床醫用或養殖業使用的氨基糖苷抗生素主要包括：妥布霉素，卡那霉素，鏈霉素，慶大霉素，新霉素，阿米卡星，安普霉素，達芐霉素，奈替米星，西索米星等。

發明內容

本發明提供了乙醇作為增敏劑提高氨基糖苷類抗生素殺菌效率的菌液預處理方法。本發明方法不以疾病的診斷或治療為目的。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

乙醇作為增敏劑提高氨基糖苷類抗生素殺菌效率的菌液預處理方法：在含有待滅細菌的菌液中加入乙醇，得到菌液預處理液，所述乙醇在菌液預處理液中的終濃度為20-30mM。

進一步，在所得菌液預處理液中加入氨基糖苷類抗生素，得到細菌與抗生素的混合物。將所述混合物置于37℃搖床培養處理，殺滅所述細菌。

所述細菌與抗生素的混合物中，抗生素的終濃度為250-1000μg/ml。

所述抗生素對待滅細菌具有殺滅作用。

當所述細菌為大腸桿菌時，所述抗生素為妥布霉素、慶大霉素、鏈霉素或卡那霉素中的一種。所述細菌與抗生素的混合物中，妥布霉素的終濃度為500μg/ml、慶大霉素的終濃度為 250μg/ml、鏈霉素的終濃度為250μg/ml，卡那霉素的終濃度為1000μg/ml。

當所述細菌為銅綠假單胞菌，所述抗生素為妥布霉素或慶大霉素中的一種。所述細菌與抗生素的混合物中，妥布霉素的終濃度為500μg/ml、慶大霉素的終濃度為250μg/ml。

本發明采用以上技術方案，在采用抗生素殺滅細菌前，先在菌液中加入乙醇進行預處理，可以大幅度提高的抗生素滅菌效率，同時在達到同樣治療效果的前提下，減少用藥量和給藥時間，從而降低抗生素的副作用。

實驗證明，針對平臺期大腸桿菌，菌液加乙醇和不加乙醇的處理組相比，處理3小時，5 小時(以妥布霉素為例)的殺菌效率分別能提高2和3個數量級。針對平臺期銅綠假單胞菌，菌液加乙醇和不加乙醇的處理組相比，處理3小時(以妥布霉素為例)的殺菌效率能提高3 個數量級。

附圖說明