[發(fā)明專利]香矛醇假單胞菌WXP-4及其在脫氮中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811635720.X
• 申請日: 2018-12-29
• 公開（公告）號: CN109652330B
• 公開（公告）日: 2020-10-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳浚;王孝萍;朵延凱;何金佳;張士漢;陳建孟
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/38;C02F101/16
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

1.香矛醇假單胞菌(Pseudomonas citronellolis)WXP-4，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號：CCTCC NO：M 2018526，保藏日期2018年08月03日，地址：中國，武漢，武漢大學(xué)，郵政編碼：430072。

2.一種權(quán)利要求1所述香矛醇假單胞菌WXP-4在脫氮中的應(yīng)用。

3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述的應(yīng)用為：將香矛醇假單胞菌WXP-4接種至以硝態(tài)氮或亞硝態(tài)氮為氮源的DM液體選擇培養(yǎng)基中，在25～50℃、0～200rpm下反應(yīng)，實現(xiàn)對硝態(tài)氮或亞硝態(tài)氮的降解；所述DM液體選擇培養(yǎng)基的終濃度組成為：氮源610-6100mg·L^-1，碳源670-23600mg·L^-1，KH₂PO₄ 1500mg·L^-1，MgSO₄·7H₂O 100mg·L^-1，Na₂HPO₄·12H₂O 7715mg·L^-1，微量元素2ml·L^-1，瓊脂20g·L^-1，溶劑為去離子水，pH＝4.0-10.0；微量元素的終濃度組成為：EDTA 5000mg·L^-1，CaCl₂ 5500mg·L^-1，CuSO₄·5H₂O250mg·L^-1，F(xiàn)eSO₄·7H₂O 500mg·L^-1，ZnSO₄ 430mg·L^-1，CoCl₂·6H₂O 240mg·L^-1，MnCl₂·4H₂O 990mg·L^-1，H₃BO₄ 14mg·L^-1，溶劑為去離子水。

4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述香矛醇假單胞菌WXP-4以O(shè)D₆₀₀值為1.4～1.6的菌懸液形式接種，體積接種量為1％。

5.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述碳源為草酸鈉、丁二酸鈉、乙醇、葡萄糖或乙酸鈉中的一種或多種任意比例的混合。

6.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述碳源和氮源中碳氮質(zhì)量比為2～15:1。

7.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述碳源濃度為2360mg·L^-1。

8.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述反應(yīng)條件為40℃，160rpm。

9.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于DM液體選擇培養(yǎng)基pH＝7.0。

10.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述菌懸液按如下步驟制備：

(1)斜面培養(yǎng)：將香矛醇假單胞菌WXP-4接種至BTB培養(yǎng)基，30℃培養(yǎng)1天，獲得斜面菌體；所述BTB培養(yǎng)基終濃度組成為：丁二酸鈉8.5g·L^-1、L-天冬酰胺酸1g·L^-1、KH₂PO₄ 1g·L^-1、FeCl₂·6H₂O 0.05g·L^-1、NaNO₂ 0.7g·L^-1、CaCl₂·2H₂O 0.2g·L^-1、MgSO₄·7H₂O 1g·L^-1、質(zhì)量濃度1％BTB乙醇溶液1mL/L，瓊脂20g·L^-1，溶劑為去離子水，pH值7.0；

(2)種子培養(yǎng)：從斜面菌體挑取菌落接種至LB培養(yǎng)基，30℃培養(yǎng)12h，獲得菌懸液；所述LB培養(yǎng)基終濃度組成為：NaCl 10g/L，蛋白胨5g/L，牛肉膏10g/L，溶劑為去離子水，pH值7.0。