[發明專利]一種基于高通量測序技術檢測DMD基因變異的引物及其應用在審
| 申請號： | 201811633167.6 | 申請日： | 2018-12-29 |
| 公開（公告）號： | CN109554443A | 公開（公告）日： | 2019-04-02 |
| 發明（設計）人： | 任緒義;張鋒;金亞南;周韻;趙鈴鈴 | 申請（專利權）人： | 杭州迪安醫學檢驗中心有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6858 | 分類號： | C12Q1/6858;C12Q1/6883;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 丁靜靜;肖明芳 |
| 地址： | 310030 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 檢測 高通量測序技術 外顯子缺失 核酸序列 檢測試劑 點突變 試劑盒 假肥大型肌營養不良癥 多重PCR引物 高通量測序 內含子區域 變異信息 產前診斷 基因變異 建庫技術 多重PCR 均一性 擴增子 靈敏度 外顯子 一次性 重復 患兒 引物 捕獲 發病率 應用 | ||
1.一種基于高通量測序技術檢測DMD基因變異的PCR引物，其特征在于，包括SEQ IDNO：1～SEQ ID NO：260所示的核苷酸序列。
2.根據權利要求1所述基于高通量測序技術檢測DMD基因變異的PCR引物，其特征在于，SEQ ID NO：1～SEQ ID NO：260所示核苷酸序列的5’端連接有Illumina測序平臺建庫所需的序列。
3.根據權利要求2所述基于高通量測序技術檢測DMD基因變異的PCR引物，其特征在于，正向引物5’端連接序列如SEQ ID NO：261所示；反向引物5’端連接序列如SEQ ID NO：262所示。
4.一種檢測DMD基因變異的試劑盒，其特征在于，該試劑盒中包括，SEQ ID NO：1～SEQID NO：260所示核苷酸序列。
5.檢測DMD基因變異的的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：
(1)將SEQ ID NO.1～SEQ ID NO：260所示核苷酸序列分為兩組，SEQ ID NO：1～SEQ IDNO：130所示核苷酸序列為A組引物，SEQ ID NO：131～SEQ ID NO：260所示核苷酸序列為B組引物，以樣本DNA為模板，進行第一輪多重PCR，得到第一輪PCR產物；
(2)使用P5通用引物、P7index引物，以與第一輪PCR產物為模板進行第二輪PCR擴增，對第二輪擴增產物進行純化，獲得DMD基因變異測序文庫；
(3)文庫質控、高通量測序，對下機數據進行生物信息學分析。
6.根據權利要求5所述檢測DMD基因變異的的方法，其特征在于，所述P5通用引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:263所示，所述P7index引物的核苷酸序列為SEQ ID NO:264、六個隨機堿基、SEQ ID NO:265依次連接。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于杭州迪安醫學檢驗中心有限公司，未經杭州迪安醫學檢驗中心有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201811633167.6/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
