[發明專利]一種正確折疊的重組狂犬病毒G蛋白胞外段及其潛在應用

有效

• 申請號: 201811631304.2
• 申請日: 2018-12-29
• 公開（公告）號: CN109627294B
• 公開（公告）日: 2020-10-09
• 發明（設計）人: 逯光文;楊凡力;葉飛;林升;楊婧
• 申請（專利權）人: 四川大學
• 主分類號: C07K14/145
• 分類號: C07K14/145
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 張勇

1.一種制備可溶、均一性好且具有正確的空間折疊的重組狂犬病毒G蛋白胞外段的方法，其特征在于，用柔性連接肽替換狂犬病毒G蛋白胞外段的第73～79位氨基酸所在區域，和狂犬病毒G蛋白胞外段的第117～125位氨基酸所在區域。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述狂犬病毒G蛋白胞外段為完整的胞外段或C-端截短的胞外段。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述完整的胞外段包括狂犬病毒G蛋白氨基酸序列第1～439位氨基酸；所述C-端截短的胞外段包括狂犬病毒G蛋白氨基酸序列第1～405位氨基酸，或第1～414位氨基酸，或第1～419位氨基酸，或第1～425位氨基酸，或第1～431位氨基酸。

4.根據權利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，柔性連接肽為GS連接肽；所述GS連接肽為以下任一種：GGS、GGGS、(GS)₂、GGSGG、GGGGS、GSGSG、(GGS)₂、(GS)₃、GGSGGSG、GSGSGSG、GGGSGGG、(GS)₄、GGSGGSGG、(GGGS)₂、GSGSGSGSG、(GGS)₃、GGSGGSGGSG、(GS)₅、(GGGGS)₂、(GGSGG)₂、(G)₃、(G)₄、(G)₅、(G)₆、(G)₇、(G)₈、(G)₉、(G)₁₀。

5.根據權利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，狂犬病毒的株系為以下任一種：CVS-11、2472、HEP-Flury、PV、Pitman Moore、MOR1-DG、MOR3-HM、NeiMeng1025C、FRA1-FX、CNX8601、CHI1-BK、MAU1-CL、Yunnan_Zt07、RVD。

6.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，狂犬病毒的株系為以下任一種：CVS-11、2472、HEP-Flury、PV、Pitman Moore、MOR1-DG、MOR3-HM、NeiMeng1025C、FRA1-FX、CNX8601、CHI1-BK、MAU1-CL、Yunnan_Zt07、RVD。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，將所述G蛋白胞外段在昆蟲細胞中表達。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述昆蟲細胞選自Sf9或Hi5細胞。

9.根據權利要求7或8所述的方法，其特征在于，還對分泌表達到細胞培養基上清中的蛋白進行親和層析粗純化。

10.應用權利要求1～9任一所述方法制備獲得的重組狂犬病毒G蛋白胞外段。

11.含有權利要求10所述的重組狂犬病毒G蛋白胞外段的組合物。

12.根據權利要求11所述的組合物，其特征在于，所述組合物為疫苗候選組分、診斷試劑盒抗原組分或疫苗抗原含量標定的標準品。

13.權利要求10所述的重組狂犬病毒G蛋白胞外段或權利要求11所述的重組狂犬病毒G蛋白胞外段的組合物在生物、醫藥領域制備產品方面的應用。