[發(fā)明專利]一種水凝膠包覆樹枝狀二氧化硅固定化CPO酶反應(yīng)器及其制備方法和應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811630107.9
• 申請(qǐng)日: 2018-12-29
• 公開（公告）號(hào): CN109750025A
• 公開（公告）日: 2019-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蔣育澄;張廣才;王渭軍;任建軍;陳寶林
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江醫(yī)藥股份有限公司昌海生物分公司;陜西師范大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N11/14
• 分類號(hào): C12N11/14;C12N11/10
• 代理公司: 西安永生專利代理有限責(zé)任公司 61201
• 代理人: 高雪霞

1.一種二氧化硅固定氯過(guò)氧化物酶反應(yīng)器，其特征在于：所述二氧化硅固定化的氯過(guò)氧化物酶由水凝膠包裹，其中二氧化硅為樹枝狀介孔二氧化硅。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述二氧化硅固定化氯過(guò)氧化物酶反應(yīng)器，其特征在于：所述水凝膠為天然多糖或合成的親水高分子化合物。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述二氧化硅固定化氯過(guò)氧化物酶反應(yīng)器，其特征在于：所述水凝膠為天然多糖，包括香菇多糖、殼聚糖、透明質(zhì)酸或其鹽、海藻酸或其鹽中任意一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述二氧化硅固定化氯過(guò)氧化物酶反應(yīng)器，其特征在于：所述水凝膠為海藻酸鈉。

5.一種根據(jù)權(quán)利要求1～4任意一項(xiàng)所述的二氧化硅固定化氯過(guò)氧化物酶反應(yīng)器的制備方法，其特征在于它由下述方法制備得到：

(1)將樹枝狀介孔二氧化硅加入到pH為2～3的PBS緩沖液中，然后加入氯過(guò)氧化物酶溶液，恒溫震蕩，離心分離，并用PBS緩沖液對(duì)固體進(jìn)行清洗，以除去未固定的氯過(guò)氧化物酶，得到樹枝狀二氧化硅固定化氯過(guò)氧化物酶；

(2)將樹枝狀二氧化硅固定化氯過(guò)氧化物酶加入pH為6～6.5的PBS緩沖液中，超聲分散均勻，然后加入水凝膠與交聯(lián)劑交聯(lián)反應(yīng)，反應(yīng)完后離心分離，得到水凝膠包覆的樹枝狀二氧化硅固定化氯過(guò)氧化物酶反應(yīng)器。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，所述樹枝狀介孔二氧化硅與氯過(guò)氧化物酶溶液的質(zhì)量-體積比為1mg:2～5μL。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于：所述氯過(guò)氧化物酶溶液的pH為5～6，其中氯過(guò)氧化物酶的濃度為0.20～0.30nmol/L。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，震蕩的溫度為10～20℃，震蕩時(shí)間為40～70min。

9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于：步驟(2)中，所述樹枝狀二氧化硅固定化氯過(guò)氧化物酶與水凝膠、交聯(lián)劑的質(zhì)量比為1:0.4～2:0.5～2。

10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于：所述的水凝膠為海藻酸鈉，交聯(lián)劑為CaCl₂。

11.根據(jù)權(quán)利要求1～4所述的任一二氧化硅固定化氯過(guò)氧化物酶反應(yīng)器在降解左氧氟沙星中的應(yīng)用。

12.根據(jù)權(quán)利要求1～4所述的任一二氧化硅固定化氯過(guò)氧化物酶反應(yīng)器在降解利福昔明中的應(yīng)用。