[發明專利]一種抑制埃博拉病毒的核酸、含有該核酸的藥物組合物及其用途

有效

• 申請號: 201811625241.X
• 申請日: 2018-12-28
• 公開（公告）號: CN111378656B
• 公開（公告）日: 2022-07-26
• 發明（設計）人: 張鴻雁;高山;康代武;劉濤
• 申請（專利權）人: 蘇州瑞博生物技術股份有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/713;A61P31/14
• 代理公司: 北京英創嘉友知識產權代理事務所(普通合伙) 11447
• 代理人: 董琳;耿超

一種抑制埃博拉病毒基因表達的siRNA，該siRNA含有正義鏈和反義鏈，正義鏈包含核苷酸序列1，反義鏈包含核苷酸序列2，核苷酸序列1和核苷酸序列2至少部分地反向互補形成雙鏈區。核苷酸序列1和核苷酸序列2的長度均為19個核苷酸，核苷酸序列2至少部分地與第一段核苷酸序列反向互補，所述第一段核苷酸序列為埃博拉病毒mRNA中與所述核苷酸序列2的長度相同的一段核苷酸序列。按照5'末端到3'末端的方向，核苷酸序列1的第7、8、9位的核苷酸為氟代修飾的核苷酸，核苷酸序列2的第2、6、14、16位的核苷酸為氟代修飾的核苷酸。該siRNA和含有該siRNA的藥物組合物具有良好的抑制埃博拉病毒基因表達的活性。

技術領域

本公開涉及一種siRNA、含有該siRNA的藥物組合物以及它們的用途。具體而言，本公開涉及一種用于抑制埃博拉病毒基因表達的siRNA、含有該siRNA作為活性成分的藥物組合物、以及所述siRNA、藥物組合物在制備用于預防和/或治療埃博拉病毒病的藥物中的應用。

背景技術

埃博拉病毒病是由纖絲病毒科(filoviridae)的埃博拉病毒(Ebola virus，EBOV)所引起的一種急性出血性傳染病。主要通過患者的血液和排泄物傳播，臨床主要表現為急性起病發熱，肌痛出血皮疹和肝腎功能損害。

EBOV屬絲狀病毒科絲狀病毒屬，為單股不分節段的負鏈RNA病毒；其分為四種亞型：扎伊爾埃博拉病毒(Zaire Ebola Virus，ZEBOV)，毒力最強，人感染后死亡率高達90％；蘇丹埃博拉病毒(Sudan Ebola Virus，SEBOV)，感染后死亡率可達50％；科特迪瓦埃博拉病毒(Cote d'Ivoire Ebola Virus，CEBOV)和萊斯頓埃博拉病毒(Reston Ebola Virus，REBOV)對非人類靈長類動物具有致死性作用，對人類毒力較弱。

EBOV基因組是負鏈RNA，長度為18.9kb，含7個開放閱讀框，其排列順序為：3’-NP-VP35-VP40-GP-VP30-VP24-L-5’，每種產物均由各自單獨的mRNA所編碼。L蛋白和VP35共同組成聚合酶，完成Ebola RNA的復制。二者是理想的治療靶點，其抑制可完全阻止RNA的合成，而且哺乳動物細胞內不存在這兩種蛋白。VP24也可作為治療靶點，因為其可抑制宿主的I型干擾素反應。

若能從基因水平沉默病毒的基因表達，阻斷埃博拉病毒的生成和復制，由此從根本上降低病毒代謝和對細胞的侵染，無疑將是最為理想的埃博拉病毒病治療手段。小干擾RNA(smallinterferingRNA，siRNA)可基于RNA干擾(RNAinterference，RNAi)這一機制，以序列特異性的方式抑制或阻斷任何感興趣的目的基因的表達，從而達到治療疾病的目的。

前人已經對siRNA作為治療埃博拉病毒病的藥物活性成分進行了研究，然而，siRNA本身的穩定性較差，在體內容易被核酸酶降解(特別是，在體內系統給藥后，siRNA首先會進入體內的血液循環系統，而血液中富含內源性核酸酶)。為克服這一障礙，其中一種手段便是對siRNA進行化學修飾，以提高siRNA在血液中的穩定性。迄今為止，本領域技術人員對siRNA進行了大量研究，可是，對siRNA在血液中的降解過程和機制仍缺乏足夠了解，對修飾方式和修飾位點的選擇依然是一個經驗主義的、必須通過反復實驗來驗證的過程。

因此，對于具有不同核苷酸序列的siRNA，技術人員仍然需要具體分析該siRNA，找出適合于該siRNA序列的具體修飾方案，以開發出具有良好穩定性、良好生物活性或和細胞毒性較低的修飾的siRNA。

發明內容

本公開的目的是提供一種能夠選擇性和有效地抑制埃博拉病毒基因的表達的siRNA分子，以及包含所述siRNA作為活性成分的藥物組合物，該藥物組合物能夠有效預防和/或治療由埃博拉病毒感染引起的病理狀況和疾病，如急性起病發熱、肌痛出血皮疹和肝腎功能損害。

發明人發現，出人意料地，本公開提供的siRNA具有顯著更高的埃博拉病毒基因抑制活性并顯示出優異的血液穩定性。