[發明專利]一種利用菜豆環氧化物水解酶制備(R)-間硝基苯乙二醇的方法

有效

• 申請號: 201811620616.3
• 申請日: 2018-12-28
• 公開（公告）號: CN109880876B
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 鄔敏辰;李闖;宗迅成;文正;胡蝶;李劍芳
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12P41/00
• 分類號: C12P41/00;C12P7/22;C12R1/19
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 張勇

1.一種制備(R)-間硝基苯乙二醇的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將外消旋的間硝基環氧苯乙烷溶解于有機試劑中；

（2）向步驟（1）所得含有外消旋的間硝基環氧苯乙烷的有機試劑中加入水溶液，所述水溶液含表達菜豆環氧化物水解酶的細胞，在20-30℃下恒溫攪拌反應8-12 h，所述菜豆環氧化物水解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的；有機相與水相的體積比為(1:4)~(3:7)；有機試劑為沸程為60-90℃的石油醚；加入的菌體質量與底物物質的量的比例δ為3-5 mg/μmol；

（3）反應結束后將整個反應體系靜置或離心，使有機相與水相分層，分取下層的水相，萃取，得到(R)-間硝基苯乙二醇；

所述細胞為表達菜豆環氧化物水解酶的重組大腸桿菌細胞；

底物的初始濃度為5-40 mM。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，編碼所述菜豆環氧化物水解酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）中水溶液包括濃度為100-200 mg/mL的菌懸液。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（3）中以乙酸乙酯作為萃取劑。

5.權利要求1-4任一所述的方法在制藥或化工領域的應用。