[發(fā)明專利]無血清納米材料凍存劑及其制備方法、使用方法，凍存液

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811618902.6
• 申請日: 2018-12-28
• 公開（公告）號: CN109497043A
• 公開（公告）日: 2019-03-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李梓菲;欒杰;王黔;穆大力;劉春軍;辛敏強(qiáng);付蘇
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院整形外科醫(yī)院
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 北京超凡志成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 張勛

1.一種無血清納米材料凍存劑，其特征在于，包括DMSO、血清替代物以及氧化石墨烯組成。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無血清細(xì)胞凍存液，其特征在于，所述DMSO與所述血清替代物的體積比為1：(9-15)之間；

優(yōu)選地，所述DMSO與所述血清替代物的體積比為1:10。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無血清納米材料凍存劑，其特征在于，所述氧化石墨烯配制成濃度為1-5ug/ml的氧化石墨烯水溶液；

優(yōu)選地，氧化石墨烯水溶液添加后終濃度為1-5ug/ml之間；

優(yōu)選地，所述氧化石墨烯水溶液的氧化石墨烯粒徑為20-200nm之間。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無血清納米材料凍存劑，其特征在于，所述血清替代物的型號為Gibco KNOCKOUT^TM血清替代物10828-028。

5.包含權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的無血清納米材料凍存劑的凍存液；

優(yōu)選地，所述凍存液中還包括無血清培養(yǎng)基構(gòu)成的細(xì)胞混懸劑。

6.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的無血清納米材料凍存劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

將DMSO添加到血清替代物中混勻，再添加氧化石墨烯水溶液混合均勻，4℃保存即可。

7.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的無血清納米材料凍存劑的使用方法，其特征在于，包括如下步驟：

將細(xì)胞與細(xì)胞混懸劑混合均勻后，逐滴加入所述細(xì)胞凍存劑，-80℃以下凍存。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的使用方法，其特征在于，細(xì)胞凍存劑加入之前先在冰水混合物中預(yù)冷；

優(yōu)選地，細(xì)胞與細(xì)胞混懸劑混合均勻后，細(xì)胞的終濃度為(1-6)×10⁶個(gè)/ml。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的使用方法，其特征在于，細(xì)胞混懸劑與細(xì)胞凍存劑的體積比控制在1：(3-5)之間，優(yōu)選地為1：4。

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的使用方法，其特征在于，凍存采用程序性降溫的方式，降溫速率為0.5-2℃/min之間，優(yōu)選地為1℃/min。