[發明專利]一種異雙功能蛋白質交聯劑的提純膜分離工藝

在審

• 申請號: 201811618531.1
• 申請日: 2018-12-28
• 公開（公告）號: CN109678778A
• 公開（公告）日: 2019-04-26
• 發明（設計）人: 呂敏杰;王桂春;柳敏
• 申請（專利權）人: 蘇州昊帆生物股份有限公司
• 主分類號: C07D207/448
• 分類號: C07D207/448
• 代理公司: 蘇州國卓知識產權代理有限公司 32331
• 代理人: 明志會

本發明涉及提純分離技術領域，尤其是一種異雙功能蛋白質交聯劑的提純膜分離工藝，包括以下步驟；步驟一、配料：按照重量百分比包括主料：馬來酰亞胺基烷基酸40?50%、二氯甲烷27?43%，氯化亞砜5?10%，對硝基苯酚5?10%，碳酸鈉4?12%，步驟二、制備：按照上述比例將馬來酰亞胺基烷基酸與二氯甲烷和氯化亞砜加入反應釜內攪拌混合2?3h，步驟三、合成反應；步驟四、提純，本發明制備的異雙功能蛋白質交聯劑合成路線收率較高，不涉及昂貴試劑的使用，成本低，易于工業化生產，采用了納米膜分離技術，濾除了小分子和無機鹽等雜質，提高了異雙功能蛋白質交聯劑的品質，產品純度從95%提高到99%以上。

技術領域

本發明涉及提純分離技術領域，尤其涉及一種異雙功能蛋白質交聯劑的提純膜分離工藝。

背景技術

蛋白質交聯劑是一類小分子化合物，具有2個或者更多的針對特殊基團（-NH2、-COOH、-HS等）的反應性末端，可以和2個或者更多的分子分別偶聯，從而使這些分子結合在一起，70年代時人們普遍使用戊二醛作為蛋白質交聯劑連接抗體和指示劑（如酶類），但其缺點是由于交聯基團是隨機的，容易形成雜亂的多聚體，80年代，更具選擇特異性的交聯劑，例如NHS（針對-COOH）和馬來酰亞胺（針對-HS)在生命科學研究中得到了更為廣泛的應用，巧妙地運用交聯劑可以在蛋白質相互作用研究，免疫學，癌癥治療等領域取得意想之外的收獲，目前在生命科學研究中，特別是抗體偶聯藥物的合成中應用廣泛；

傳統的異雙功能蛋白質交聯劑有機反應后處理主要是依賴蒸餾、重結晶等方法，在少量反應時效果較好，但產業化時就存在操作復雜、提純度不高、損失較大等缺點，所以用于合成抗體偶聯藥物后的藥效大打折扣。

發明內容

本發明的目的在于提供一種異雙功能蛋白質交聯劑的提純膜分離工藝，以解決上述背景技術中提出的問題，本發明采用了納米膜分離技術，濾除了小分子和無機鹽等雜質，提高了異雙功能蛋白質交聯劑的品質。

為了實現上述目的，本發明采用了如下技術方案：

設計一種異雙功能蛋白質交聯劑的提純膜分離工藝，包括以下步驟；

步驟一、配料：按照重量百分比包括主料：馬來酰亞胺基烷基酸40-50%、二氯甲烷27-43%，氯化亞砜5-10%，對硝基苯酚5-10%，碳酸鈉4-12%。

步驟二、制備：按照上述比例將馬來酰亞胺基烷基酸與二氯甲烷和氯化亞砜加入反應釜內攪拌混合2-3h，然后將反應釜升溫至25℃-30℃進行反應3-8h；

步驟三、合成反應：按照上述比例將對硝基苯酚加入反應釜內與步驟一得到的溶劑均勻的混合，之后向反應釜內加入碳酸鈉進行縮合反應3-8h得到異雙功能蛋白質交聯劑；

步驟四、提純：

S1、將步驟三得到的溶劑加入平衡缸內儲存；

S2、將平衡缸內的溶劑通過供料泵的加壓以一定的流速通過管道輸送到膜組件內進行膜分離；

S3、小于膜截留分子量的物質透過膜組件形成滲透液被排出，大于膜截留分子量的物質則被膜組件截留后的濃縮液經壓力表和調節閥流回平衡缸。

優選的，步驟三中，所述合成反應完成后還包括：濃縮除去過量的氯化亞砜。

優選的，步驟四中，所述供料泵與膜組件之間的管道螺接流量計。

優選的，所述平衡缸的左側頂端焊接有螺旋輸料斗。

本發明提出的一種異雙功能蛋白質交聯劑的提純膜分離工藝，有益效果在于：

1、本發明制備的異雙功能蛋白質交聯劑合成路線收率較高，不涉及昂貴試劑的使用，成本低，易于工業化生產；