[發明專利]一種HPLC法分離測定度他雄胺原料藥及制劑中降解雜質的方法

有效

• 申請號: 201811617633.1
• 申請日: 2018-12-28
• 公開（公告）號: CN109490444B
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發明（設計）人: 張穎;顏波
• 申請（專利權）人: 重慶華邦制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34;G01N30/74;G01N30/06
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所(普通合伙) 11308
• 代理人: 黎昌莉

本發明具體涉及一種采用高效液相色譜法分離和測定度他雄胺原料藥及制劑中降解雜質的方法，該雜質是在強制降解條件下生成。本發明的方法采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，用流動相A和流動相B進行線性梯度洗脫。由于目前各國藥典上均未有度他雄胺軟膠囊質量標準，也沒有相關的任何文獻或者標準報道，因此該套HPLC法為完全自建的一套方法，本發明摸索了檢測波長、稀釋劑質量濃度等條件確定出一套適合該物質檢測的方法。該方法在檢測時干擾小，且專屬性好，重現性好，準確度高，對度他雄胺軟膠囊的質量控制能起到提供技術支持的作用。

技術領域

本發明屬于分析化學領域，具體涉及一種采用高效液相色譜法分離和測定度他雄胺原料藥及制劑中降解雜質的方法。

背景技術

度他雄胺是一種白色結晶固體的化學品，其分子式為C₂₇H₃₀F₆N₂O₂，臨床上主要用于治療前列腺腫大、男性型脫發、脂溢性脫發和遺傳性脫發。度他雄胺的結構式如下：

2,5-二三氟甲基苯胺為度他雄胺軟膠囊在強酸、強堿、高溫條件下生成的降解雜質，也是合成度他雄胺時的起始原料，其分子式為C₈H₅F₆N，結構式如下：

經查詢，目前各國藥典上均未有度他雄胺軟膠囊質量標準，也沒有相關的任何文獻或者標準報道。按照進口質量標準JX20130056有關物質方法進行檢測，主成分峰相對保留時間約6.5min，而降解雜質2,5-二三氟甲基苯胺出峰時間約為5min，位于大量輔料峰的中間，干擾明顯，故進口標準不適用于本降解雜質的檢測。因此需要開發一套能準確檢測該雜質含量且不受干擾的方法，對度他雄胺軟膠囊的質量控制能起到提供技術支持的作用。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種采用高效液相色譜法分離和測定度他雄胺原料藥及制劑中2,5-二三氟甲基苯胺的方法。

為實現上述目的，本發明的技術方案為：

一種HPLC法分離測定度他雄胺原料藥及制劑中降解雜質的方法，該方法采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，用乙腈-水-三氟乙酸的混合液作為流動相A和用甲醇作為流動相B進行梯度洗脫，進入檢測器檢測；所述降解雜質為2,5-二三氟甲基苯胺，結構式如下：

本發明中采用的色譜柱規格為Kromasil 100-5C18，250mm×4.6mm，5μm，或其他性能相當的色譜柱。

進一步，動相A中乙腈、水、三氟乙酸的體積比為500-520:450-480:0.2-0.3，作為一種優選為520:480:0.25。

進一步，檢測器的檢測波長為300-320nm，作為一種優選，本發明的檢測波長為310nm；檢測柱溫為35℃。

進一步，梯度洗脫條件為：0min，流動相A與流動相B的體積比為70：30；13min，流動相A與流動相B的體積比為70：30；15min，流動相A與流動相B的體積比為10：90；30min，流動相A與流動相B的體積比為10：90；31min，流動相A與流動相B的體積比為70：30；40min，流動相A與流動相B的體積比為70：30；梯度洗脫的流速為1.0ml/min。

進一步，根據以上描述的方法，具體檢測包括以下步驟：

1)取度他雄胺樣品，加稀釋劑溶解稀釋制得樣品溶液；

2)取2,5-二三氟甲基苯胺對照品，加稀釋劑溶解稀釋制成每1ml中約含0.75μg和0.25μg的溶液，分別作為對照品溶液和靈敏度測試溶液；