[發明專利]鴨蛋減產綜合征病毒檢測方法及其試劑盒

有效

• 申請號: 201811616095.4
• 申請日: 2018-12-27
• 公開（公告）號: CN111378782B
• 公開（公告）日: 2022-11-29
• 發明（設計）人: 李澤君;宿鑫;閆大為;碩盾
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院上海獸醫研究所（中國動物衛生與流行病學中心上海分中心）
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 上海序倫律師事務所 31276
• 代理人: 周東萍

本發明公開一種鴨蛋減產綜合征病毒檢測試劑盒，包含：針對鴨蛋減產綜合征病毒SEQ ID NO：1所示基因序列設計的上游引物和下游引物，該上游引物和下游引物用于擴增SEQ ID NO：1所示基因序列中的基因片段。本發明的試劑盒，能快速、準確、及時地診斷鴨蛋減產綜合征，對有效防控鴨蛋減產綜合征具有重要意義。

技術領域

本發明涉及生物工程技術領域，具體涉及一種鴨蛋減產綜合征病毒檢測方法及其試劑盒。

背景技術

2016年以來，首先在種鴨場陸續發生了不明原因的產蛋下降，鴨群產蛋率下降20～30％，數周后有一定恢復，但很難恢復到發病前的產蛋率，從而導致種鴨場遭受巨大經濟損失。該病的主要癥狀是蛋鴨產蛋下降，因此將該病命名為鴨蛋減產綜合征。該病在中國不斷蔓延，全國主要的蛋鴨生產地區都有該病的暴發，但目前尚無診斷該鴨蛋減產綜合征的檢測方法及試劑盒，對鴨蛋減產綜合征的防控非常不利，急需開發有效的鴨蛋減產綜合征檢測試劑盒。

發明內容

本發明要解決目前對鴨蛋減產綜合征的診斷手段有限的技術問題，提供一種新型鴨蛋減產綜合征病毒的檢測試劑盒，該新型病毒是從鴨蛋減產綜合征發病鴨中分離獲得的一株全新的鴨蛋減產綜合征病毒，本發明試劑盒可快速、簡便、準確地檢測該鴨蛋減產綜合征病毒，對鴨蛋減產綜合征作出及時診斷。

為了解決上述技術問題，本發明通過如下技術方案實現:

在本發明的一個方面，提供了一種鴨蛋減產綜合征病毒檢測試劑盒，包含：針對鴨蛋減產綜合征病毒SEQ ID NO：1所示基因序列設計的上游引物和下游引物，該上游引物和下游引物組成的引物對用于擴增SEQ ID NO：1所示基因序列中的基因片段。

優選的，所述上游引物和下游引物包括下述引物對中的任意一對或兩對以上組合：SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4，SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6，SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8。

在本發明中，兩對以上引物對，可用于套式PCR檢測，如本發明的一個實施例中，先用第一對引物SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4進行PCR擴增，再用第二對引物SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8，以第一次擴增產物為模板進行第二次PCR擴增。

優選的，所述試劑盒還包含探針，該探針與擴增出的基因片段相結合，該探針的5’端標記有熒光報告基團，3’端標記有熒光淬滅基團。

更優選的，所述試劑盒包含下述引物對和探針：SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10所示引物對，SEQ ID NO：11所示探針；或者SEQ ID NO：12和SEQ ID NO：13所示引物對，SEQ IDNO：14所示探針。

優選的，所述試劑盒還包含發光染料。

優選的，所述試劑盒還包含陽性對照，該陽性對照為鴨蛋減產綜合征病毒AH204株。

所述試劑盒檢測鴨蛋減產綜合征病毒的方法包括普通RT-PCR、套式RT-PCR、或熒光定量RT-PCR。

在本發明的另一方面，還提供了上述鴨蛋減產綜合征病毒檢測試劑盒在制備快速診斷鴨蛋減產綜合征的產品中的應用。

本發明鴨蛋減產綜合征病毒檢測試劑盒，具有特異性強、靈敏度高的特點，能快速、準確、及時地診斷相關的鴨蛋減產綜合征。

附圖說明

下面結合附圖和具體實施方式對本發明作進一步詳細的說明。

圖1是本發明實施例1引物AH204-F1和AH204-R1的PCR鑒定電泳圖；

圖2是本發明實施例1引物AH204-F2和AH204-R2的PCR鑒定電泳圖；