[發明專利]黃病毒科病毒囊膜蛋白的融合蛋白及其制備方法與應用在審
| 申請號： | 201811613477.1 | 申請日： | 2018-12-27 |
| 公開（公告）號： | CN109705222A | 公開（公告）日： | 2019-05-03 |
| 發明（設計）人： | 龔睿;楊春鵬;曾芳;高新宇;張哲 | 申請（專利權）人： | 中國科學院武漢病毒研究所 |
| 主分類號： | C07K19/00 | 分類號： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85;A61K39/12;A61K47/42;A61P31/14 |
| 代理公司： | 武漢河山金堂專利事務所(普通合伙) 42212 | 代理人： | 胡清堂 |
| 地址： | 430071 湖北省武*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 黃病毒科病毒 囊膜蛋白 融合蛋白 抗體 制備 應用 病毒表面 空間構象 體外篩選 天然構象 細胞免疫 空間表 廣譜 應答 誘導 疫苗 融合 | ||
1.一種黃病毒科病毒囊膜蛋白的融合蛋白，它是由黃病毒科病毒囊膜蛋白與人源IgG的抗體Fc片段組成的融合蛋白。
2.根據權利要求1所述的黃病毒科病毒囊膜蛋白的融合蛋白，其特征在于：所述融合蛋白的編碼基因序列是通過搭橋PCR的方法將黃病毒科病毒囊膜蛋白的基因與人源IgG的抗體Fc片段的基因融合得到。
3.根據權利要求1所述的黃病毒科病毒囊膜蛋白的融合蛋白，其特征在于：所述人源IgG的抗體Fc片段的基因經過人工突變，所述突變位點為Fc片段的鉸鏈區部分的半胱氨酸堿基。
4.根據權利要求3所述的黃病毒科病毒囊膜蛋白的融合蛋白，其特征在于：所述半胱氨酸堿基突變為編碼絲氨酸的堿基。
5.一種寨卡病毒囊膜蛋白與Fc片段的融合蛋白，其氨基酸全長序列為Seq ID No.2。
6.根據權利要求5所述寨卡病毒囊膜蛋白與Fc片段的融合蛋白，其特征在于：所述融合蛋白的編碼基因序列為Seq ID No.1。
7.一種權利要求5所述寨卡病毒囊膜蛋白與Fc片段的融合蛋白的制備方法，其步驟如下：
(1)制備Fc的基因片段和寨卡病毒囊膜蛋白的基因片段；所述寨卡病毒囊膜蛋白的基因為ZE胞外域的1-408氨基酸的編碼序列；
(2)將Fc的基因片段和寨卡病毒囊膜蛋白的基因片段融合得到完整的ZE-Fc基因；
(3)以ZE-Fc基因序列構建表達載體，轉染，表達，純化得到目的蛋白。
8.一種權利要求5所述寨卡病毒囊膜蛋白與Fc片段的融合蛋白的制備方法，其特征在于：所述Fc的基因片段為突變基因，所述突變為將野生型Fc鉸鏈區部分的半胱氨酸堿基突變為編碼絲氨酸的堿基。
9.根據權利要求7所述寨卡病毒囊膜蛋白與Fc片段的融合蛋白的制備方法，其特征在于：所述步驟(3)為：以ZE-Fc基因序列構建昆蟲表達載體，并轉染到果蠅S2細胞中，構建穩轉表達細胞系，進行真核表達，純化得到目的蛋白。
10.權利要求1所述黃病毒科病毒囊膜蛋白的融合蛋白，在制備抗病毒抗體和疫苗中的應用。
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