[發明專利]擬南芥eIF5B1基因在提高菊花耐高溫性中的應用

在審

• 申請號: 201811611288.0
• 申請日: 2018-12-27
• 公開（公告）號: CN109536512A
• 公開（公告）日: 2019-03-29
• 發明（設計）人: 曹小迎;孟來生;宛雯;王景儀;徐夢珂
• 申請（專利權）人: 江蘇師范大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/82;C12N15/11;A01H5/00;A01H6/14
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擬南芥eIF5B1基因在提高菊花耐高溫性中的應用。所述擬南芥eIF5B1基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本發明的擬南芥eIF5B1基因可用于培育耐高溫菊花良種，通過在轉基因菊花中表達上述的擬南芥eIF5B1基因可大大提高菊花的耐高溫性，在培育耐高溫菊花育種技術領域具有較好的應用前景。

技術領域

本發明涉及分子生物學、基因工程領域，具體地涉及擬南芥eIF5B1基因在提高菊花耐高溫性中的應用。

背景技術

高溫是影響菊花生長發育、生殖和產量的重要逆境因子之一。高溫導致菊花激活一些特異細胞或組織的細胞程序性死亡，該過程會導致葉片脫落，幼苗迅速失綠直至死亡，導致花期的花器官變小、花藥不開裂、花粉活性降低、花粉生長素含量顯著降低等，嚴重時會導致花或果實的不能形成，甚至整株植株死亡。提高菊花的耐高溫性對于增強菊花的耐逆性具有重要意義。

發明內容

作為本發明的一個方面，提供了擬南芥eIF5B1基因，其核苷酸序列為下列序列之一：

(1)如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；

(2)如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列經添加、替換、插入或缺失一個或幾個核苷酸而成的同源序列；

(3)如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列的等位基因或所述等位基因衍生物的核苷酸序列。

本發明還提供了一種表達載體，其含有上述擬南芥eIF5B1基因全序列或部分片段。

本發明還提供了一種轉基因細胞系，其含有上述擬南芥eIF5B1基因的全序列或部分片段。

本發明還提供了一種工程菌，其含有上述擬南芥eIF5B1基因的全序列或部分片段。

本發明還提供了上述擬南芥eIF5B1基因在提高菊花耐高溫性中的應用。

本發明還提供了上述擬南芥eIF5B1基因在制備轉基因菊花中的應用。

本發明還提供了上述擬南芥eIF5B1基因在菊花種質資源改良中的應用。

本發明還提供了用于PCR擴增上述擬南芥eIF5B1基因的引物，其特征在于，其序列如SEQ ID No.2-3所示。

本發明還提供了一種制備耐高溫轉基因菊花的方法，其通過在轉基因菊花中表達上述的擬南芥eIF5B1基因實現。

本發明的有益效果：本發明的擬南芥eIF5B1基因可用于培育耐高溫菊花良種，通過在轉基因菊花中表達上述的擬南芥eIF5B1基因可大大提高菊花的耐高溫性，在培育耐高溫育種技術領域具有較好的應用前景。

附圖說明

圖1為pCB308R的T-DNA區的組成及35S及eIF5B1的插入位置；

圖2為Western Bloting檢測蛋白表達情況其中，WT為未轉基因愈傷，T為轉基因愈傷；M：Marker；

圖3為RT-PCR檢測轉基因表達情況，其中，WT為未轉基因愈傷，T為轉基因愈傷；M：Marker；

圖4為轉基因愈傷GUS染色結果；

圖5為高溫脅迫結果照片，其中，A和C為40℃處理的未轉基因愈傷，B和D為40℃處理的轉eIF5B1基因愈傷，E和F為35℃處理的轉eIF5B1基因愈傷。

具體實施方式：

本發明提供的項目實施方案用于說明本發明，但是不局限于本發明的范圍。如果沒有特別指出，本發明實施中的技術手段為本研究領域的常用技術，所用原料為市場所購。若未特別指明，實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規手段。