[發明專利]一種血管內皮生長因子的檢測試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 201811608343.0
• 申請日: 2018-12-26
• 公開（公告）號: CN109709336A
• 公開（公告）日: 2019-05-03
• 發明（設計）人: 張嘉慶
• 申請（專利權）人: 張嘉慶
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543
• 代理公司: 蘇州中合知識產權代理事務所(普通合伙) 32266
• 代理人: 趙曉芳

1.一種血管內皮生長因子的檢測試劑盒，包括：鏈霉親和素偶聯的磁性微粒、生物素標記的VEGF抗體、化學發光標記物標記的VEGF抗體、VEGF標準品、化學發光預激發液、化學發光激發液、清洗液。

2.根據權利要求1所述的一種血管內皮生長因子的檢測試劑盒，其特征在于，所述化學發光標記物為吖啶酯或吖啶酯衍生物，所述吖啶酯衍生物包括吖啶酯酸-NHS酯、吖啶酸丙磺酸鈉鹽或9-吖啶羧酸。

3.根據權利要求1所述的一種血管內皮生長因子的檢測試劑盒，其特征在于，所述化學發光預激發液為含有質量百分比為0.1-1％的乙醇以及質量百分比0.1-1％的Triton X-100和/或Tween-20的質量分數為0.1-1％的H₂O₂溶液，所述化學發光激發液為含有質量百分比0.1-1％的乙醇以及質量百分比0.1-1％的Triton X-100和/或Tween-20的摩爾濃度為0.05-lmol/L的NaOH溶液。

4.根據權利要求1所述的一種血管內皮生長因子的檢測試劑盒，其特征在于，所述鏈霉親和素偶聯的磁性微粒由pH為6-8、摩爾濃度為0.01-0.2mol/L的磷酸鹽緩沖液或Tris緩沖液配制而成，粒徑為0.05-2μm。

5.根據權利要求1所述的一種血管內皮生長因子的檢測試劑盒，其特征在于，所述磁性微粒內核為四氧化三鐵或三氧化二鐵，磁性微粒的表面修飾基團為羧基。

6.根據權利要求1所述的一種血管內皮生長因子的檢測試劑盒，其特征在于，所述VEGF標準品是以牛血清白蛋白緩沖液為溶劑，加入VEGF抗原純品配制而成。

7.根據權利要求6所述的一種血管內皮生長因子的檢測試劑盒，其特征在于，所述的VEGF標準品是配成的具有多個濃度梯度的VEGF標準品。

8.根據權利要求1所述的一種血管內皮生長因子的檢測試劑盒，其特征在于，所述清洗液包括質量百分比0.5-10％的Triton X-100和/或Tween 20，pH為6-8、摩爾濃度為0.1-0.5mol/L的磷酸鹽緩沖液或Tris緩沖液以及質量百分比0.5-5％的Proclin 300。

9.采用權利要求1-8任一項所述的一種血管內皮生長因子的檢測試劑盒的檢測方法，包括：

(1)取生物素標記的VEGF抗體、待測樣品、化學發光標記物標記的VEGF抗體于反應容器中，充分混勻，并于37℃孵育10～30min，同時準備VEGF標準品；

(2)向反應體系中加入鏈霉親和素偶聯的磁性微粒，充分混勻，并于37℃孵育3～10min，后清洗分離磁性微粒；向磁性微粒中加入化學發光預激發液和化學發光激發液的混合溶液，反應并測定光強度；

(3)根據VEGF標準品濃度與光強度繪制標準曲線，樣品光強度在標準曲線上相對應的濃度值即為待測樣品的測定濃度。