[發(fā)明專利]呼吸道病原體的多重PCR檢測(cè)試劑盒、用途及其使用方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201811605021.0 | 申請(qǐng)日: | 2018-12-26 |
| 公開(公告)號(hào): | CN109487008B | 公開(公告)日: | 2022-03-29 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 陳威;董璐;歐陽許芬 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 中元匯吉生物技術(shù)股份有限公司 |
| 主分類號(hào): | C12Q1/70 | 分類號(hào): | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 400000 重慶市大渡口區(qū)*** | 國省代碼: | 重慶;50 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 呼吸道 病原體 多重 pcr 檢測(cè) 試劑盒 用途 及其 使用方法 | ||
1.呼吸道病原體的多重PCR檢測(cè)試劑盒,其特征在于:所述試劑盒包括檢測(cè)甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感1、副流感II、副流感III、腺病毒、偏肺病毒和鼻病毒九種病原體的引物對(duì)及探針的混合物;
所述甲型流感病毒的引物對(duì)由SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的兩條序列組成;
所述乙型流感病毒的引物對(duì)由SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的兩條序列組成;
所述呼吸道合胞病毒的引物對(duì)由SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的兩條序列組成;
所述副流感病毒I的引物對(duì)由SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示的兩條序列組成;
所述副流感病毒II的引物對(duì)由SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示的兩條序列組成;
所述副流感病毒III的引物對(duì)由SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示的兩條序列組成;
所述腺病毒的引物對(duì)由SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14所示的兩條序列組成;
所述偏肺病毒的引物對(duì)由SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16所示的兩條序列組成;
所述鼻病毒的引物對(duì)由SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18所示的兩條序列組成;
所述甲型流感病毒的探針為SEQ ID NO:19所示的序列或其反向互補(bǔ)序列;
所述乙型流感病毒的探針為SEQ ID NO:20所示的序列或其反向互補(bǔ)序列;
所述呼吸道合胞病毒的探針為SEQ ID NO:21所示的序列或其反向互補(bǔ)序列;
所述副流感病毒I的探針為SEQ ID NO:22所示的序列或其反向互補(bǔ)序列;
所述副流感病毒II的探針為SEQ ID NO:23所示的序列或其反向互補(bǔ)序列;
所述副流感病毒III的探針為SEQ ID NO:24所示的序列或其反向互補(bǔ)序列;
所述腺病毒的探針為SEQ ID NO:25所示的序列或其反向互補(bǔ)序列;
所述偏肺病毒的探針為SEQ ID NO:26所示的序列或其反向互補(bǔ)序列;
所述鼻病毒的探針為SEQ ID NO:27所示的序列或其反向互補(bǔ)序列。
2.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)試劑盒,其特征在于:所述的探針的兩端分別帶有熒光基團(tuán)和猝滅基團(tuán),所述熒光基團(tuán)為VIC,ROX,F(xiàn)AM和CY5中的一種,所述猝滅基團(tuán)為BHQ1、BHQ2、BHQ3和MGBNFQ中的一種。
3.如權(quán)利要求2所述的檢測(cè)試劑盒,其特征在于:所述檢測(cè)試劑盒還包括PCR反應(yīng)液,所述反應(yīng)液主要由如下組分組成:10×Bufferfor Taq 10%-50%;MgCl2 1-10mM;DTT 0-5mM;dATP 0.05-1mM;dCTP 0.05-1mM;dGTP 0.05-1mM;dUTP 0.1-2mM。
4.如權(quán)利要求3所述的檢測(cè)試劑盒,其特征在于:所述反應(yīng)液還包括BSA 0-10mg/mL和甘油0%-10%。
5.如權(quán)利要求4所述的檢測(cè)試劑盒,其特征在于:所述PCR反應(yīng)液主要由如下組分組成:10×Buffer for Taq 15%;MgCl2 2mM;DTT 1mM;dATP 0.2mM;dCTP 0.2mM;dGTP0.2mM;dUTP 0.4mM;BSA 1.5mg/mL和甘油5%。
6.如權(quán)利要求3所述的檢測(cè)試劑盒,其特征在于:所述檢測(cè)試劑盒還包括PCR酶液,所述PCR酶液主要由如下組分組成:Taq DNA Polymerase 10-50%;UNG 0-20%;SuperscriptV0.1%-10%;DTT 0-5mM;甘油0-50%。
7.如權(quán)利要求6所述的檢測(cè)試劑盒,其特征在于:所述PCR酶液還包括Anti-Taq0-50%。
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