[發(fā)明專利]生物催化丙烯腈水合反應(yīng)的方法、產(chǎn)腈菌株的滅活方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811604897.3
• 申請(qǐng)日: 2018-12-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109652474A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-04-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王林;趙國(guó)華;徐強(qiáng);黃偉;劉艷麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽巨成精細(xì)化工有限公司
• 主分類號(hào): C12P13/02
• 分類號(hào): C12P13/02;C12N1/36;C12N1/20;C12R1/365
• 代理公司: 合肥市浩智運(yùn)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 34124
• 代理人: 王亞洲

1.一種生物催化丙烯腈水合反應(yīng)的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一、對(duì)諾卡氏菌進(jìn)行耐受性訓(xùn)練；

步驟二、然后經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)、篩選，得到合格發(fā)酵液；

步驟三、合格發(fā)酵液經(jīng)離心后，去除上清液，清洗得菌液；

步驟四、菌液進(jìn)行滅活處理；

步驟五、將滅活后的菌液作為催化劑，催化丙烯腈水合反應(yīng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物催化丙烯腈水合反應(yīng)的方法，其特征在于，所述步驟一的耐受性訓(xùn)練是用55～60wt％的丙烯酰胺水溶液浸泡菌種16～40h，然后分離純化、復(fù)壯培養(yǎng)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物催化丙烯腈水合反應(yīng)的方法，其特征在于，所述步驟二中發(fā)酵培養(yǎng)中發(fā)酵罐培養(yǎng)的溫度為23.5～27.5℃，通入壓縮空氣流量為210～240m³/h,保持罐內(nèi)壓力為0.05～0.07Mpa，培養(yǎng)時(shí)間為55～60h。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物催化丙烯腈水合反應(yīng)的方法，其特征在于，所述步驟二中的篩選具體工藝為：取樣做酶活力檢測(cè)，酶活達(dá)到1600～2000μg/mL·h為合格發(fā)酵液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物催化丙烯腈水合反應(yīng)的方法，其特征在于，所述步驟三中離心的轉(zhuǎn)速為4000r/min、離心時(shí)間為15min。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物催化丙烯腈水合反應(yīng)的方法，其特征在于，所述步驟四中滅活處理的具體工藝為：加入菌液總體積0.5～1％的滅活劑甲醛，對(duì)菌液進(jìn)行滅活處理，滅活時(shí)控制溫度30～37℃，滅活時(shí)間控制在3～5h。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物催化丙烯腈水合反應(yīng)的方法，其特征在于，所述步驟五中的催化劑、純水、丙烯腈三者的的質(zhì)量比為1:240:75。

8.一種產(chǎn)腈菌株的滅活方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟一、對(duì)諾卡氏菌進(jìn)行耐受性訓(xùn)練；

步驟二、然后經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)、篩選，得到合格發(fā)酵液；

步驟三、合格發(fā)酵液經(jīng)離心后，去除上清液，清洗得菌液；

步驟四、菌液進(jìn)行滅活處理。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的產(chǎn)腈菌株的滅活方法，其特征在于：所述步驟一的耐受性訓(xùn)練是用55～60wt％的丙烯酰胺水溶液浸泡菌種16～40h，然后分離純化、復(fù)壯培養(yǎng)。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的產(chǎn)腈菌株的滅活方法，其特征在于：所述步驟四中滅活處理的具體工藝為：加入菌液總體積0.5～1％的滅活劑甲醛，對(duì)菌液進(jìn)行滅活處理，滅活時(shí)控制溫度30～37℃，滅活時(shí)間控制在3～5h。