[發(fā)明專利]一種貓艾滋病毒重組蛋白及其制備方法和應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201811602967.1 | 申請日： | 2018-12-26 |
| 公開（公告）號： | CN109734783A | 公開（公告）日： | 2019-05-10 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李曉光;劉毅;王哲侃;徐玉霞 | 申請（專利權(quán)）人： | 杭州愛謹(jǐn)生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/155 | 分類號： | C07K14/155;C07K16/10;C12N15/70;G01N33/569 |
| 代理公司： | 杭州信義達專利代理事務(wù)所(普通合伙) 33305 | 代理人： | 施建勇 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市江干區(qū)*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 單鏈抗體 艾滋病毒 艾滋病毒p24抗原 重組蛋白 制備方法和應(yīng)用 基因 艾滋病毒抗原 合成核酸序列 生物醫(yī)藥技術(shù) 單克隆抗體 抗原決定簇 技術(shù)開發(fā) 原核細(xì)胞 重組抗體 密碼子 調(diào)取 復(fù)性 構(gòu)建 真核 優(yōu)化 查找 細(xì)胞 開發(fā) | ||
1.一種貓艾滋病毒重組蛋白，其特征在于:包括貓艾滋病毒抗原和貓艾滋病毒單鏈抗體:
所述貓艾滋病毒抗原為含有主要抗原決定簇的p24抗原；
所述貓艾滋病毒單鏈抗體為scFv。
2.一種基于權(quán)利要求1所述的一種貓艾滋病毒重組蛋白的制備方法，其特征在于:包括以下步驟:
(1)查找貓艾滋病毒中含有主要抗原決定簇的p24抗原；
(2)優(yōu)化貓艾滋病毒p24抗原基因的密碼子，合成核酸序列并進行表達；
(3)構(gòu)建針對貓艾滋病毒p24抗原的單鏈抗體，調(diào)取單鏈抗體scFv的基因；
(4)重組優(yōu)化的貓艾滋病毒p24抗原基因和針對貓艾滋病毒p24抗原的單鏈抗體scFv的基因，并進行表達；
(5)純化及復(fù)性貓艾滋病毒重組蛋白。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種貓艾滋病毒重組蛋白的制備方法，其特征在于:所述步驟(2)和步驟(4)在大腸桿菌系統(tǒng)中表達。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種貓艾滋病毒重組蛋白的制備方法，其特征在于:所述步驟(2)和步驟(4)表達時的誘導(dǎo)溫度為20℃、25℃、28℃或37℃，誘導(dǎo)轉(zhuǎn)速為250rpm，誘導(dǎo)的IPTG濃度為0.1mM。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種貓艾滋病毒重組蛋白的制備方法，其特征在于:所述誘導(dǎo)溫度為25℃或37℃。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種貓艾滋病毒重組蛋白的制備方法，其特征在于:所述誘導(dǎo)溫度為25℃。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種貓艾滋病毒重組蛋白的制備方法，其特征在于:所述步驟(5)的純化方式選自離子交換層析、凝膠過濾層析或親和層析。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種貓艾滋病毒重組蛋白及其制備方法，其特征在于:所述步驟(5)的純化方式為親和層析，并在純化時加入6XHis標(biāo)簽。
9.一種基于權(quán)利要求1所述的一種貓艾滋病毒重組蛋白的應(yīng)用，其特征在于:所述重組蛋白用于制備貓艾滋病毒檢測試劑盒。
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