[發明專利]OsRBR2基因在創制水稻雄性不育系中的應用

有效

• 申請號: 201811602847.1
• 申請日: 2018-12-26
• 公開（公告）號: CN109371042B
• 公開（公告）日: 2021-07-02
• 發明（設計）人: 段遠霖;吳為人;潘美珍;蔡正正
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82;A01H5/00;A01H5/02;A01H6/46
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.OsRBR2基因在創制水稻雄性不育系中的應用，其特征在于：所述OsRBR2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO: 1所示，其編碼的氨基酸序列如SEQ ID NO: 2所示。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的水稻雄性不育株系的創制方法，是采用CRISPR/Cas9編輯方法定點敲除OsRBR2基因，使該基因在水稻中完全失去功能，進而獲得水稻雄性不育株系。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述CRISPR/Cas9編輯方法具體包括：選擇常規水稻品種，采用CRISPR/Cas9編輯系統定點敲除OsRBR2基因，使得水稻中SEQ ID NO: 1所示的核苷酸序列發生缺失、置換、插入變異，進而使得SEQ ID NO: 2所述氨基酸序列發生改變而引起其功能喪失。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述水稻品種為秈稻明恢86。

5.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述CRISPR/Cas9編輯系統定點敲除的方法包括如下步驟：

(a) 合成單核苷酸序列引物，序列如SEQ ID NO: 3和 SEQ ID NO: 4所示；

(b) 通過退火反應使（a）中合成的兩條引物序列形成二聚體結構并連接入載體，構建含有OsRBR2基因靶序列的質粒；

(c) 利用攜帶步驟（b）中構建的含OsRBR2基因靶序列的質粒的根農桿菌浸染水稻品種；

(d) 利用如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO: 6所示的OsRBR2基因的特異引物對擴增基因組片段并測序，篩選出OsRBR2基因序列發生改變的突變體植株。