[發明專利]蔬菜中維生素B1含量的檢測方法

在審

• 申請號: 201811600665.0
• 申請日: 2018-12-26
• 公開（公告）號: CN109709238A
• 公開（公告）日: 2019-05-03
• 發明（設計）人: 孫明恩;朱禹;王鑫
• 申請（專利權）人: 江蘇佳信檢測技術有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/34
• 代理公司: 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257
• 代理人: 馮瑞

本發明涉及一種蔬菜中維生素B1含量的檢測方法：將蔬菜在25?40℃下干燥后粉碎成80?150目的顆粒，然后將顆粒進行酶解，酶解結束后過濾，向濾液中加入有機溶劑進行萃取，得到維生素的有機溶液；采用堿性鐵氰化鉀水溶液對其進行柱前衍生，然后將維生素的有機溶液進行高效液相色譜分析，分離出維生素B1，得到其峰面積，高效液相色譜分析的條件為：色譜柱為C18反相柱；流動相包含30?40重量份的甲醇和60?70重量份的醋酸鈉水溶液；流動相流速為0.8?1.2mL/min；柱溫為25?35度；進樣量為5?10微升；配制標準樣品溶液：稱取維生素B1標準樣品，制成標準樣品溶液；建立標準曲線：將待測樣同一位置的峰面積與標準曲線進行對比，得到維生素B1的濃度。

技術領域

本發明涉及食品檢測技術領域，尤其涉及一種蔬菜中維生素B1含量的檢測方法。

背景技術

維生素，是人和動物為維持正常的生理功能而必須從食物中獲得的一類微量有機物質，在人類成長、代謝、發育過程中發揮著重要的作用，雖然它并不參與構成人體細胞，也不為人體提供能量，但是卻是維持身體健康所必需的一類有機化合物。

維生素B1在有氧化劑存在時容易被氧化產生脫氫硫胺素，在酸性溶液中很穩定，在堿性溶液中不穩定，易被氧化和受熱破壞。

蔬菜中的維生素B1含量較低，現階段，維生素B1含量的檢測方法前處理步驟繁瑣，時間長，重復性差。而檢測過程中，前處理方法是決定定量分析的重要環節，提取方法會對產物的產量和質量產生重要影響，進而干擾定量分析的準確性。

此外，目前采用高效液相色譜對維生素B1進行定量分析，所需成本較高，出峰時間較長，靈敏度有待提高。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明的目的是提供一種蔬菜中維生素B1含量的檢測方法，本發明的檢測樣本的前處理步驟簡單，測試效率高，速度快，本發明的樣本前處理步驟加上優化設置的檢測條件，可實現高通量、高精度的維生素B1的定量檢測。

為了實現以上發明目的，本發明提供一種蔬菜中維生素B1含量的檢測方法，包括以下步驟：

(1)將蔬菜在25-40℃下干燥后粉碎成80-150目的顆粒，然后將所述顆粒進行酶解，酶解結束后過濾，向濾液中加入有機溶劑進行萃取，得到維生素的有機溶液；

(2)采用5-10g/L的堿性鐵氰化鉀水溶液對所述維生素的有機溶液進行柱前衍生，然后對處理過的維生素的有機溶液進行高效液相色譜分析，分離出維生素B1，得到其峰面積，其中高效液相色譜分析的條件為：色譜柱為C18的反相柱；流動相包含30-40重量份的甲醇和60-70重量份的醋酸鈉水溶液；流動相流速為0.8-1.2mL/min；柱溫為25-35℃；進樣量為5-10微升；

(3)配制標準樣品溶液：稱取維生素B1標準樣品，制成標準樣品溶液；

(4)建立標準曲線：將所述標準樣品溶液在步驟(2)的條件下進行高效液相分析，并且統計其色譜峰的面積，并且以峰面積為縱坐標，已知濃度為橫坐標，建立標準曲線；

(5)將步驟(2)中同一出峰時間的峰面積與標準曲線進行對比，得到維生素B1的濃度，并計算蔬菜中維生素B1的含量。

進一步地，在步驟(1)中，干燥時間為20-48h。

進一步地，在步驟(1)中，酶解在35-45℃下進行，酶解時間為30-40h。

進一步地，在步驟(1)中，在pH值為6.5-8.0條件下酶解。

進一步地，在步驟(1)中，酶解所用的酶為α-胰凝乳蛋白酶、羧肽酶A和木瓜蛋白酶中的一種或幾種。優選地，酶解所用的酶為α-胰凝乳蛋白酶和羧肽酶A。

進一步地，在步驟(1)中，所述有機溶劑為正丁醇、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜和氯仿中的一種或幾種。