[發明專利]檢測過氧亞硝酸根的熒光探針及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201811600544.6
• 申請日: 2018-12-26
• 公開（公告）號: CN109608414B
• 公開（公告）日: 2020-09-29
• 發明（設計）人: 唐波;解希雷;劉光照;王栩;焦曉云
• 申請（專利權）人: 山東師范大學
• 主分類號: C07D277/66
• 分類號: C07D277/66;C07D221/14;C07D265/38;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 鄭平

本發明屬于合成與檢測技術領域，尤其涉及檢測過氧亞硝酸根的熒光探針及其制備方法和應用。本發明提供檢測過氧亞硝酸根的通用型識別基團，并將其與常用熒光團連接構建出了三種新的熒光探針，分別命名為BT?FAP、NA?FAP、NR?FAP，它們分別以苯并噻唑?氨基萘(BT)、萘酰亞胺(NA)、苯并吩噁嗪(NR)為熒光團，以甲酰胺(FAP)作為識別基團，可實現與ONOO^?瞬時響應(均4s)，且靈敏度高、選擇性好，非常適用于細胞中ONOO^?的熒光成像研究。

技術領域

本發明屬于合成與檢測技術領域，尤其涉及基于甲酰胺識別基團、可用于檢測過氧亞硝酸根的熒光探針及其制備方法與應用。

背景技術

在生物體內，過氧亞硝酸根(ONOO^-)是重要的活性氮物種，由超氧自由基陰離子和一氧化氮反應生成，能同時代表氧化應激和硝化應激的水平。而且，現有研究已表明，ONOO^-與多種疾病的發生和發展密切相關，包括神經退行性疾病、糖尿病、癌癥等。ONOO^-在生理條件下的半衰期短且穩態濃度極低，使得檢測活細胞及活體組織中的ONOO^-變得十分困難。基于熒光探針的熒光分析法能夠在細胞和動物模型中實時可視化分子事件，為上述問題的解決提供了有效的分析方法。然而，目前已報道的檢測ONOO^-的熒光探針普遍存在以下問題：(1)識別基團不具有普遍適用性，很難推廣到其他熒光基團，增加了新探針的設計難度；(2)探針化學結構復雜，合成路線長，合成困難，無法實現規模化生產。這些問題造成了現有的ONOO^-的熒光探針的實際應用受到了很大限制，不利于大規模推廣應用，因此，有必要開發新的用于檢測ONOO^-的熒光探針及其制備方法。

發明內容

針對上述現有技術中存在的問題，本發明旨在提供檢測過氧亞硝酸根的熒光探針及其制備方法和應用。本發明提供檢測過氧亞硝酸根的通用型識別基團，并將其與常用熒光團連接構建出了三種新的熒光探針，分別命名為BT-FAP、NA-FAP、NR-FAP，它們分別以苯并噻唑-氨基萘(BT)、萘酰亞胺(NA)、苯并吩噁嗪(NR)為熒光團，以甲酰胺(FAP)作為識別基團，可實現與ONOO^-瞬時響應(均4s)，且靈敏度高、選擇性好，非常適用于細胞中ONOO^-的熒光成像研究。

本發明的目的之一是提供三種基于甲酰胺識別基團的檢測過氧亞硝酸根的熒光探針。

本發明的目的之二是提供上述基于甲酰胺識別基團的檢測過氧亞硝酸根的熒光探針的制備方法。

本發明的目的之三是提供上述基于甲酰胺識別基團的檢測過氧亞硝酸根的熒光探針在肝癌細胞中的成像方法。

本發明的目的之四是提供基于甲酰胺識別基團的檢測過氧亞硝酸根的熒光探針及其在肝癌細胞中的成像方法的應用。

為實現上述發明目的，具體的，本發明公開了下述技術方案：

首先，本發明公開第一種基于甲酰胺識別基團的檢測過氧亞硝酸根的熒光探針，將其命名為BT-FAP，其結構式為：

其次，本發明公開第二種基于甲酰胺識別基團的檢測過氧亞硝酸根的熒光探針，將其命名為NA-FAP，其結構式為：

再次，本發明公開第三種基于甲酰胺識別基團的檢測過氧亞硝酸根的熒光探針，將其命名為NR-FAP，其結構式為：

再其次，本發明公開上述三種基于甲酰胺識別基團的檢測過氧亞硝酸根的熒光探針的制備方法，反應方程式分別為：