[發明專利]玉米赤霉烯酮時間分辨熒光免疫層析定量檢測試紙條

在審

• 申請號: 201811580759.6
• 申請日: 2018-12-24
• 公開（公告）號: CN111351926A
• 公開（公告）日: 2020-06-30
• 發明（設計）人: 洪霞;袁超;丁炎
• 申請（專利權）人: 南京億特生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/558;G01N33/531;G01N33/577;G01N33/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.玉米赤霉烯酮快速時間分辨熒光免疫層析定量檢測試紙條，其特征在于：包括Fusion5膜、硝酸纖維素膜以及吸水紙三部分，硝酸纖維素膜位于中間，Fusion5膜與吸水紙分別搭接于硝酸纖維素膜左右兩端，Fusion5膜上有加樣區和微球區，微球區上載有玉米赤霉烯酮單克隆抗體時間分辨熒光微球；硝酸纖維素膜上有檢測線和質控線，檢測線上包被玉米赤霉烯酮抗原，質控線上包被抗兔抗體。

2.如權利要求1所述的試紙條，其特征在于：所述時間分辨熒光微球包括檢測微球和質控微球，檢測微球為表面包被有玉米赤霉烯酮單抗的熒光微球，質控微球為表面包被有兔抗標記蛋白的熒光微球。

3.如權利要求1或2所述的試紙條，其特征在于：所述時間分辨熒光微球的粒徑范圍為100 - 1000 nm 。

4.如權利要求1所述的試紙條，其特征在于：所述檢測線上包被玉米赤霉烯酮檢測用抗原為玉米赤霉烯酮與載體物質形成的偶合物；檢測線上包被二抗 - 抗兔抗體。

5.如權利要求1所述的試紙條的制備方法，其制備步驟如下：

⑴. 質控微球制備：

① 用生物素標記蛋白；

② 采用上述標記蛋白包被醛基修飾的熒光微球；

⑵. 檢測微球制備：采用玉米赤霉烯酮的單抗包被醛基修飾的熒光微球；

⑶. 空白大卡粘貼：將硝酸纖維素膜粘貼在塑料底板中間，Fusion5膜與吸水紙分別搭接于硝酸纖維素膜左右兩端；

⑷. 噴膜：將兔抗標記蛋白的熒光微球和玉米赤霉烯酮單抗的熒光微球采用釋放緩沖液混合稀釋到一定濃度，噴到Fusion5膜的微球區；玉米赤霉烯酮抗原和抗兔抗體稀釋后，分別噴到硝酸纖維素膜的T線和C線位置；

⑸ 干燥及切條。

6.如權利要求5所述的制備方法，其特征在于：步驟⑷中釋放緩沖液組成為10 - 15%蔗糖、3 - 10%海藻糖、0. 5 - 1% N，O-雙三甲硅基乙酰胺（BSA）、0.1 - 0.5%慶大霉素。

7.如權利要求5所述的制備方法，其特征在于：步驟⑷稀釋后檢測微球終濃度為0.5 -3mg/mL，質控微球終濃度0.05 - 0.3 mg/mL；T線抗原終濃度0.5 - 3mg/mL，C線抗原終濃度0. 5 - 3 mg/mL；C，T線噴膜液量為0.5 - 1.5 μ1/cm，微球噴膜量為2 - 10 μl/cm。

8.如權利要求5所述的制備方法，其特征在于：步驟⑸中烘干條件為37℃烘干12 - 16

小時。

9.如權利要求5權利要求所述的玉米赤霉烯酮快速時間分辨熒光免疫層析定量檢測試紙條，其特征在于：試紙條底部設有塑料底板。

10.如權利要求1所述的試紙條的應用，其特征在于：該試紙條用于采用競爭法模式的免疫層析的定量檢測。