[發明專利]一種基于鈣、磷血液生化標記選育武定雞的方法

在審

• 申請號: 201811571605.0
• 申請日: 2018-12-21
• 公開（公告）號: CN109540818A
• 公開（公告）日: 2019-03-29
• 發明（設計）人: 豆騰飛;賈俊靜;閆世雄;李濤;徐志強;段小花;谷大海;劉麗仙;葛長榮;黃英;李琦華;榮華;王坤;孫帥;程志斌
• 申請（專利權）人: 云南農業大學
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/33;G01N21/82;G01N33/53
• 代理公司: 北京名華博信知識產權代理有限公司 11453
• 代理人: 李中強

1.一種基于鈣、磷血液生化標記選育武定雞的方法，其特征在于：具體包括以下步驟：

1)采集待測定武定雞的血樣，制備血清，檢測其血鈣(Ca)、血磷(P)的濃度值；

2)將步驟1)測得的濃度值與武定雞血液生化標記進行對比，將待測武定雞區別為骨骼發育正常型武定雞和骨骼發育異常型武定雞。

2.根據權利要求1所述的一種基于鈣、磷血液生化標記選育武定雞的方法，其特征在于：武定雞血液生化標記的確立具體包括以下步驟：

a.從武定雞資源群體中隨機選擇骨骼發育正常型武定雞家系和骨骼發育異常型武定雞家系，分別檢測其腿骨骨密度、骨強度，采集血樣，制備血清；

b.血鈣(Ca)含量測定及計算方法：選用血鈣(Ca)酶聯免疫試劑盒，應用鄰甲酚酞絡合酮比色法對血清中的鈣離子濃度進行測定，即在堿性條件下，樣品中鈣離子與鄰甲酚酞絡合酮生成紅色絡合物；在600nm測量吸光度，吸光度增加與血清鈣離子濃度成正比，與同樣處理的標準品比較，可求得樣本中鈣離子的含量；血鈣濃度的計算如下：C_樣品＝A_樣品/A_校準×C_校準

c.血磷(P)含量測定及計算方法：選用血磷(P)酶聯免疫試劑盒，應用紫外終點法對血清中的無機磷濃度進行測定，即在酸性條件下鉬酸銨同血清中的無機磷反應，形成非還原性磷鉬酸化合物，在340nm測量吸光度，吸光度增加與血清無機磷成正比，與同樣處理的標準品比較，可求得樣本中無機磷的含量；血磷濃度的計算如下：C_樣品＝A_樣品/A_校準×C_校準

d.根據步驟b、c所得數據，得出骨骼發育正常型武定雞和骨骼發育異常型武定雞血鈣、血磷的濃度值，再根據所選取的武定雞的腿骨骨密度、骨強度，進行血鈣、血磷與骨密度、骨強度的相關性分析；

e.根據步驟d所得到的分析結果，確定武定雞的血液生化標記。

3.根據權利要求1-2任一項所述的一種基于鈣、磷血液生化標記選育武定雞的方法，其特征在于：所述武定雞的血液生化標記為血鈣、血磷的濃度值，一月齡時，當血鈣的濃度值在3.31mmol/L以上，且血磷的濃度值在2.44mmol/L以上，判定為骨骼發育正常型武定雞，反之為骨骼發育異常型武定雞；二月齡時，當血鈣的濃度值在3.46mmol/L以上，且血磷的濃度值在2.49mmol/L以上，判定為骨骼發育正常型武定雞，反之為骨骼發育異常型武定雞。

4.根據權利要求1-2任一項所述的一種基于鈣、磷血液生化標記選育武定雞的方法，其特征在于：采血前斷水、斷食12小時，于次日早晨進行翅靜脈采血；用離心管收集血樣，靜置30min于室溫下3000rpm離心20min，取上清液，獲得血清。