[發明專利]負載腫瘤抗原的聚多巴胺納米粒子及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201811571427.1
• 申請日: 2018-12-21
• 公開（公告）號: CN111346236B
• 公開（公告）日: 2023-03-14
• 發明（設計）人: 張海玲;冷希崗;王曉莉;王寧;楊影
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院生物醫學工程研究所
• 主分類號: A61K47/69
• 分類號: A61K47/69;A61K47/59;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京酷愛智慧知識產權代理有限公司 11514
• 代理人: 張紹磊

本發明涉及一種負載腫瘤抗原的聚多巴胺納米粒子及其制備方法與應用，負載腫瘤抗原的聚多巴胺納米粒子是將腫瘤抗原通過邁克爾加成和席夫堿反應共價連接到聚多巴胺納米顆粒的表面上制備而成；其中，腫瘤抗原包括但不限于特異的腫瘤抗原肽段、腫瘤細胞裂解物、特異的腫瘤抗原DNA片段及佐劑CpG中的一種或多種。本發明制備得到的負載腫瘤抗原的聚多巴胺納米粒子具有良好的生物相容性，可以有效激活體內的抗腫瘤免疫，顯著地抑制腫瘤細胞的生長，還能改善腫瘤免疫抑制微環境，進一步增強肌體的抗腫瘤活性；可用于腫瘤的免疫治療；制備方法溫和簡單、無污染。

技術領域

本發明涉及生物材料技術領域，具體涉及一種負載腫瘤抗原的聚多巴胺納米粒子及其制備方法與應用。

背景技術

全世界每年死于惡性腫瘤者大約880萬人，新發病例1400萬。最新統計資料顯示，近二十年來，中國癌癥死亡率上升了近百分之三十，每四、五個死亡者中就有一個死于癌癥，居死亡原因前三位。雖然臨床上應用手術治療、放化療等方法治療惡性腫瘤，但依然有不少患者出現術后復發，耐受不了放化療的毒副作用等狀況。新興的腫瘤免疫治療給中晚期腫瘤患者帶來希望，但目前臨床受益不明顯。

腫瘤免疫治療主要有兩方面的障礙：一是無法有效激活體內的抗腫瘤免疫，二是很難克服腫瘤微環境對已經激活的免疫殺傷細胞的免疫抑制作用。有效的抗原呈遞是抗腫瘤免疫的關鍵先決條件，其需要激活抗原提呈細胞(APC)，而樹突狀細胞(DC細胞)是最強的抗原提呈細胞。通常大多數抗原被DC細胞吞噬后不能從溶酶體中逃逸，最終由MHC II分子提呈抗原，其僅引發體液免疫。為了誘導對抗腫瘤免疫至關重要的特異性的細胞免疫，即細胞毒性T淋巴細胞(CTL)產生，抗原必須由MHC I分子提呈，并同時在DC細胞表面表達相應的共刺激分子。因此，有必要設計一種腫瘤抗原遞送系統，其能夠向DC細胞質中遞送腫瘤抗原，促進在DC細胞質中的交叉呈遞以激活MHC I介導的呈遞，并最終誘導細胞免疫，激活CTL對腫瘤的殺傷活性。

負載腫瘤抗原的納米顆粒遞送系統由于具有更容易被DC吸收和更有效地促進抗原呈遞等優點受到越來越多的關注。納米顆粒遞送有可能彌補傳統腫瘤疫苗的缺陷。盡管已經將多種納米材料用于抗原遞送，但是那些納米材料的表面改性仍然具有挑戰性。由于聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)或聚乳酸(PLA)納米粒子固有的化學惰性，一些偶聯劑或活化的連接臂是抗原修飾所必需的。此外，改性過程通常是多步反應，隨后的純化效率低且繁瑣。生物安全問題也是納米材料開發和醫學應用中的主要問題。陽離子聚合物，如殼聚糖(CS)和聚乙烯亞胺(PEI)，可有效傳遞抗原并引發免疫反應，但由于它們造成細胞膜受損，故其可能具有較高的細胞毒性。因此，研發作為抗原遞送系統的高效、無毒生物材料仍然是一個瓶頸。

聚多巴胺(PDA)納米粒子由于其優異的生物相容性，已迅速應用于生物成像，光熱療法和藥物傳遞系統等許多生物學領域。作為單體的多巴胺不僅是關鍵神經遞質之一，也是神經系統和免疫系統之間重要的信號分子。作為細胞外信息分子，多巴胺通過與免疫細胞上的多巴胺受體相互作用來調節免疫系統，并能觸發多個關鍵T細胞功能。此外，研究發現多巴胺通過激活內皮細胞和腫瘤細胞上的多巴胺受體使其具有抗血管生成和抗癌活性。因此，作為多巴胺自聚物的PDA將可能成為腫瘤免疫療法中的抗原遞送載體的優異材料。

發明內容

本發明的目的是提供一種高效的腫瘤抗原遞送系統，即負載腫瘤抗原的聚多巴胺納米粒子，即將腫瘤抗原共價連接到聚多巴胺納米粒子表面而成；其中，腫瘤抗原包括但不限于特異的腫瘤抗原肽段、腫瘤細胞裂解物、特異的腫瘤抗原DNA片段及佐劑CpG中的一種或多種。