[發(fā)明專利]一組鑒別小管福壽螺的特異性引物對及方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811570982.2
• 申請日: 2018-12-21
• 公開（公告）號: CN109486966B
• 公開（公告）日: 2021-09-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 胡薇;李健;朱世林;冉甄;易存;相慢玉;郭云海;張儀
• 申請（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 上海浦一知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31211
• 代理人: 鄭權(quán)

1.一組鑒別小管福壽螺的特異性引物對，其特征在于，所述特異性引物對的核苷酸序列為：

Pc-F：5’-ATGATAGCATCGCATCTTCT；

Pc-R：5’-TCGTTGTTGGCACTTCTAA。

2.一種基于PCR快速鑒別小管福壽螺的方法，其特征在于，包括如下步驟：

1）提取待測福壽螺樣本的基因組DNA；

2）以步驟1）提取的基因組DNA為模板，用如SEQ ID NO:1所示和如SEQ ID NO:2所示的一對特異性引物進行PCR擴增；

3）對PCR產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳實驗，在凝膠成像儀下進行觀察，查看目標位置625bp是否出現(xiàn)特異性條帶。

3. 如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟2）中進行PCR擴增的PCR反應(yīng)體系為：每個PCR反應(yīng)的總體積為20μl，包含11.6 μl H₂O、2 μl 10×Buffer、2 μl dNTP、0.4 μl Taq、特異性引物對的上、下游引物各1μl、基因組DNA 2 μl。

4.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟2）中PCR擴增程序為：(1)94℃預(yù)變性5min；(2)94℃變性30s；(3)56℃退火30s；(4)72℃延伸60s；(5)步驟(2)—(4)重復(fù)35個循環(huán)后，72℃再延伸10min。

5.如權(quán)利要求1所述的一組特異性引物對用于鑒別小管福壽螺的應(yīng)用。

6.如權(quán)利要求1所述的一組特異性引物對用于區(qū)分小管福壽螺與斑點福壽螺的應(yīng)用。

7.如權(quán)利要求1所述的一組特異性引物對用于區(qū)分小管福壽螺與小管福壽螺雜交種的應(yīng)用。

8.如權(quán)利要求1所述的一組特異性引物對在制備鑒別小管福壽螺的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

9.如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述產(chǎn)品為檢測試劑。

10.如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述產(chǎn)品為檢測試紙或檢測試劑盒。

11.一種用于鑒別小管福壽螺的檢測試劑盒，其特征在于，包含如權(quán)利要求1所述的一組特異性引物對。

12.如權(quán)利要求1所述的一組特異性引物對用于區(qū)分小管福壽螺與中華圓田螺的應(yīng)用。