[發明專利]一種鐮刀菌菌株及其發酵生產D-泛解酸內酯水解酶的方法

有效

• 申請號: 201811570594.4
• 申請日: 2018-12-21
• 公開（公告）號: CN110157623B
• 公開（公告）日: 2022-07-12
• 發明（設計）人: 陳華;張旭東;夏理山
• 申請（專利權）人: 合肥工業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N9/18;C12R1/77
• 代理公司: 蘇州翔遠專利代理事務所(普通合伙) 32251
• 代理人: 王華

本發明公開了一株鐮刀菌(Fusarium sp.)CH1701，已于2018年12月07日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏編號為CGMCC No.16967。本發明的鐮刀菌(Fusarium sp.)CH1701是一種全新的菌種，其在含有可同化碳源、氮源和微量元素鹽的發酵培養基中，并在通氧的條件下通過發酵可產生D?泛解酸內酯水解酶。

技術領域

本發明涉及一種鐮刀菌菌株及其發酵生產D-泛解酸內酯水解酶的方法，屬于微生物菌株篩選和發酵技術領域。

背景技術

D-泛酸鈣，為維生素B族化合物，廣泛應用于食品、飼料和醫藥工業，市場需求量大。通常，采用異丁醛、甲醛、氰化鈉合成DL-泛解酸內酯，再通過化學法拆分或生物酶法拆分獲得D-泛解酸內酯，最后由β-丙氨酸鈣與D-泛解酸內酯直接縮合而得到D-泛酸鈣。

化學法拆分DL-泛解酸內酯的缺點是：奎寧化合物、手性胺等化學拆分劑成本高，雜質分離困難，且不利于環保。

D-泛解酸內酯水解酶選擇性拆分：首先，D-泛解酸內酯水解酶選擇性水解外消旋的DL-泛解酸內酯生成D-泛解酸，再利用溶解性不同將D-泛解酸與L-泛解酸內酯分離，D-泛解酸經過內酯化形成高光學純度的D-泛解酸內酯。回收利用L-泛解酸內酯，消旋化反應得到DL-泛解酸內酯，重新用于拆分。酶法拆分成本低、工藝簡單、環境友好，目前已實現工業化生產D-泛酸鈣、D-泛酸、D-泛醇，具體步驟如圖1所示。

2001年，中國專利CN 1313402 A公開了一株能產D-泛解酸內酯水解酶的微生物菌株串珠鐮孢霉菌Fusarium moniliforme SW-902(CGMGG 0536)，發酵液酶活達到3～6U/l，以此為基礎推動了酶法選擇性拆分生產D-泛解酸內酯的工業化。

生產菌株的酶活高低對酶法拆分工藝的順利實施、是否具有經濟競爭力有關鍵的影響。因此，有必要篩選能夠高產D-泛解酸內酯水解酶的微生物菌種和建立酶的高效制備方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種鐮刀菌菌株及其發酵生產D-泛解酸內酯水解酶的方法。

為實現上述目的及其他相關目的，本發明提供的技術方案是：一株鐮刀菌(Fusarium sp.)CH1701，已于2018年12月07日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏編號為CGMCC No.16967。

為實現上述目的及其他相關目的，本發明提供的技術方案是：一種利用鐮刀菌發酵生產D-泛解酸內酯水解酶的方法，包括一培養基，該培養基含有可同化的碳源、可同化的氮源和可同化的微量元素，然后將鐮刀菌接種于所述培養基進行有氧發酵。

優選的技術方案為：所述可同化的碳源為甘油、葡萄糖、蔗糖、淀粉、工業糖蜜、乳糖、麥芽糖、海藻糖、木聚糖、甘露醇、山梨醇和糊精中的至少一種。

優選的技術方案為：所述可同化的氮源為黃豆餅粉、玉米漿干粉、蛋白胨、酵母抽提物、胰蛋白胨、棉籽餅粉、花生餅粉、酵母粉、牛肉浸膏、麩質粉、麩皮、尿素和銨鹽中的至少一種。

優選的技術方案為：所述可同化的微量元素來源于MgSO₄·7H₂O、ZnSO₄·7H₂O、FeSO₄·7H₂O、MnCl₂·4H₂O、CoCl₂·6H₂O、CuSO₄·5H₂O、CaCl₂、Na₂MoO₄·2H₂O和FeCl₃·6H₂O中的至少一種。