[發明專利]一種中藥材龍膽和堅龍膽的鑒別和區分方法

在審

• 申請號: 201811569613.1
• 申請日: 2018-12-21
• 公開（公告）號: CN109358136A
• 公開（公告）日: 2019-02-19
• 發明（設計）人: 李振雨;陳萬發;李樂;王利偉;吳文平;陳向東
• 申請（專利權）人: 廣東一方制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州市南鋒專利事務所有限公司 44228
• 代理人: 劉媖

1.一種中藥材龍膽和堅龍膽的鑒別和區分方法，其特征在于：包括如下步驟：

（1）采用HPLC法建立龍膽和堅龍膽的特征圖譜；

（2）根據藥材在HPLC特征圖譜中呈現的特征峰值不同，判定其為龍膽或堅龍膽。

2.根據權利要求1所述的一種中藥材龍膽和堅龍膽的鑒別和區分方法，其特征在于：步驟（1）所述的龍膽和堅龍膽HPLC特征圖譜的建立方法，包括如下步驟：

（1）參照物溶液的制備：取龍膽苦苷對照品、獐牙菜苦苷對照品、馬錢苷酸對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含龍膽苦苷、獐牙菜苦苷、馬錢苷酸各100μg的混合溶液，即得；

（2）供試品溶液的制備：取過四號篩的藥材粉末約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20mL，密塞，稱定重量，加熱回流15分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；

（3）測定：分別精密吸取參照物溶液和供試品溶液各5μL，注入液相色譜儀，測定，即得；其色譜條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈為流動相A，0.1%醋酸水溶液為流動相B，按下表中的規定進行梯度洗脫；流速為每分鐘0.80mL；柱溫為30℃；檢測波長為240nm，理論板數按龍膽苦苷峰計算應不低于3000；

。

3.根據權利要求1所述的一種中藥材龍膽和堅龍膽的鑒別和區分方法，其特征在于：步驟（2）所述的龍膽藥材在HPLC特征圖譜中應呈現6個特征峰，其中3個峰應分別與相應的參照物峰保留時間相一致；與龍膽苦苷參照物峰相對應的峰為S峰，計算特征峰4，5，6的相對保留時間，其相對保留時間應在規定值的±10%范圍之內，規定值為：1.07，2.18，2.24；與堅龍膽區別點：在HPLC特征圖譜中，特征峰4與峰5之間，不出現峰高大于峰6的色譜峰。

4.根據權利要求1所述的一種中藥材龍膽和堅龍膽的鑒別和區分方法，其特征在于：步驟（2）所述的堅龍膽藥材在HPLC特征圖譜中呈現5個特征峰，與龍膽苦苷參照物相應的峰為S峰，計算各特征峰與S峰的相對保留時間：其相對保留時間應在規定值的±10％之內，規定值為：1.07，2.14；與龍膽的區別點：在HPLC特征圖譜中，峰4和峰5之間，出現峰高大于峰5的色譜峰。