[發明專利]大數值孔徑顯微物鏡波像差測量系統和測量方法有效
| 申請號: | 201811560793.7 | 申請日: | 2018-12-20 |
| 公開(公告)號: | CN109580183B | 公開(公告)日: | 2020-12-25 |
| 發明(設計)人: | 廖家勝;鞏巖;張帥 | 申請(專利權)人: | 中國科學院蘇州生物醫學工程技術研究所 |
| 主分類號: | G01M11/02 | 分類號: | G01M11/02 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 數值孔徑 顯微 物鏡 波像差 測量 系統 測量方法 | ||
本發明公開了一種大數值孔徑顯微物鏡波像差測量系統和測量方法,該系統包括激光器、準直擴束系統、中性濾光片、旋轉毛玻璃、第一分光鏡、第二分光鏡、波前傳感器、聚光鏡、光闌、光電倍增管、校準平面鏡及蓋玻片。本發明公開了一種非相干式測量顯微物鏡波像差的方法,本發明可適用于任意大數值孔徑(浸油/非浸油)顯微物鏡波像差測量;利用入射平行光束口徑大于顯微物鏡出瞳,能保證任意大數值孔徑顯微物鏡波像差測量;本發明采用非相干測量模式,可減少雜散條紋的影響,通過精確對焦功能,確保測量波像差無離焦因素影響,同時利用蓋玻片自身反射,測量的波像差與顯微物鏡設計及真實使用狀態一致,更能實現顯微物鏡的精準測量。
技術領域
本發明涉及光學測量技術領域,特別涉及一種大數值孔徑顯微物鏡波像差測量系統和測量方法。
背景技術
隨著科學技術的快速發展,顯微鏡的應用領域愈來愈廣。除了傳統的教學、科研、醫療和工業等應用領域外,在微電子制造、新材料研發、生命科學研究和新藥開發等領域都有新的應用。2014年諾貝爾化學獎授予美國科學家埃里克·貝齊格、威廉·莫納和德國科學家斯特凡·黑爾等三位科學家,以表彰他們為發展超分辨率熒光顯微鏡所作的貢獻,該獎項的頒布進一步推動了顯微技術向超分辨領域的快速發展,也促進了高端顯微系統和儀器的研發。此外,生命科學和醫療健康行業在我國國民經濟中的地位日益突出,以顯微技術為基礎的數字化病理切片儀、二代基因測試儀等先進醫療成像及診斷儀器的需求日益增大。這些因素使古老的顯微技術換發了新的生機,顯微領域的技術也需隨時代而進步。顯微鏡系統最核心的部件是顯微物鏡,其作用相當于航空飛機的發動機。顯微物鏡的質量決定了顯微鏡系統的性能指標。
評價顯微物鏡成像質量最科學有效的方法是出瞳波像差測量,針對顯微物鏡波像差的測量,泰曼格林于20世紀提出四種基于泰曼格林干涉儀測量顯微物鏡波像差的方法(光學車間檢測一書中有詳細論述),第一種利用凹面半球鏡,一束大于出瞳的測量光束經顯微物鏡會聚,再經凹面半球鏡共軛反射回去,這種方法對于長工作距、無蓋玻片、非浸油的顯微物鏡非常準確,但對于有蓋玻片、浸油的顯微物鏡,該方法適用性很差,一、半球鏡須浸油,很難保證油均勻;二、凹面鏡上面必須加蓋玻片,蓋玻片與物鏡之間還需浸油,極短工作距造成該種方式下共軛點非常難找,不具備實際操作性。第二種方法將凹面半球鏡變成凸面半球鏡,該種方法可以將蓋玻片和標準鏡集成至一起,理論上解決了第一種方法蓋玻片放置及油的不均勻性問題。但實際上對半球鏡的加工提出了更高地要求,除了面型外,還有中心厚度要求。此外這種方法也很難尋找共軛點,操作起來復雜。
第三種方法,利用平面鏡將測量光束反射回去,這種方法與帶蓋玻片顯微鏡真實波像差有差別,而且不易確定顯微物鏡焦平面。第四種方法需要一個參考顯微物鏡,參考顯微物鏡的數值孔徑必須大于被測量顯微物鏡的數值孔徑,測量方式有兩種,一種默認參考顯微物鏡的波像差為零,測量結果即為待測顯微物鏡的波像差,一般以一個標準的顯微物鏡作為參考物鏡,第二種通過三個顯微物鏡旋轉180度比較測量,獲得待測顯微物鏡的波像差,此方法對旋轉精度有很高要求,兩種測量方式的共軛點均不易尋找。
以上四種方法均建立在干涉的基礎上,其核心為泰曼格林干涉儀,通過測量光束與參考光束干涉條紋獲得顯微物鏡波像差,由于顯微物鏡本身內部含有多組鏡片,因此除主要干涉條紋外,還有一些雜光條紋,雜光條紋也對測量結果造成影響。
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