[發(fā)明專利]一種制備去氫甲基睪丸素產(chǎn)品的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811550168.4
• 申請(qǐng)日: 2018-12-18
• 公開（公告）號(hào): CN109456378B
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳來喜;胡愛國;甘紅星
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖南科瑞生物制藥股份有限公司
• 主分類號(hào): C07J1/00
• 分類號(hào): C07J1/00
• 代理公司: 長沙歐諾專利代理事務(wù)所(普通合伙) 43234
• 代理人: 歐穎

1.一種制備去氫甲基睪丸素產(chǎn)品的方法，其特征在于，所述方法包括先采用大豆油生產(chǎn)過程中的脫臭餾出物經(jīng)包含結(jié)晶分離的步驟得到植物甾醇，再采用營養(yǎng)培養(yǎng)基和一種或多種微生物菌種使得植物甾醇經(jīng)微生物發(fā)酵后制備得到1，4-雄二烯二酮即IDD，再以所述IDD為原料，在甲基鹵化鎂、有機(jī)溶劑和酸存在下，在17位引入α-CH₃和β-OH，制備得到所述去氫甲基睪丸素，然后將得到的去氫甲基睪丸素在丙酮或C4以下低碳醇中以活性炭加熱回流脫色并重結(jié)晶，得去氫甲基睪丸素產(chǎn)品；

其中，格氏試劑甲基鹵化鎂的制備步驟和由IDD制備去氫甲基睪丸素的步驟為：

加入35g鎂粉、800ml四氫呋喃，攪拌，保溫于30-35℃通入98g氯甲烷，通完后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)4～6小時(shí)，直至鎂粉基本消失，得格氏試劑甲基氯化鎂備用；加入100gIDD，500mlTHF，攪拌升溫至50～55℃，慢慢滴加800ml上述格氏試劑甲基氯化鎂溶液，1-1.5小時(shí)滴完，再繼續(xù)保溫?cái)嚢璺磻?yīng)2～3小時(shí)，TLC檢測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)，反應(yīng)完后，慢慢滴加2N鹽酸至pH2-3，滴完后于50～55℃繼續(xù)水解反應(yīng)2-3小時(shí)；

或者是加入35g鎂粉、800ml四氫呋喃，攪拌，保溫于40-45℃通入120g溴甲烷，通完后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)2～3小時(shí)，直至鎂粉基本消失，得格氏試劑甲基溴化鎂備用；加入100gIDD，500ml甲苯，攪拌升溫至50～55℃，慢慢滴加800ml上述格氏試劑甲基溴化鎂溶液，1-1.5小時(shí)滴完，再繼續(xù)保溫?cái)嚢璺磻?yīng)2～3小時(shí)，TLC檢測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)，反應(yīng)完后，慢慢滴加2N鹽酸至pH2-3，滴完后于50～55℃繼續(xù)水解反應(yīng)2-3小時(shí)；

或者是加入35g鎂粉、800ml乙醚，攪拌，保溫于30-35℃滴加150g碘甲烷，通完后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)4～6小時(shí)，直至鎂粉基本消失，得格氏試劑甲基碘化鎂備用；加入100gIDD，500ml苯，攪拌升溫至50～55℃，慢慢滴加800ml上述格氏試劑甲基碘化鎂溶液，約1-1.5小時(shí)滴完，再繼續(xù)保溫?cái)嚢璺磻?yīng)2～3小時(shí)，TLC檢測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)，反應(yīng)完后，慢慢滴加2N鹽酸至pH2-3，滴完后于50～55℃繼續(xù)水解反應(yīng)2-3小時(shí)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，反應(yīng)過程中包括先向有機(jī)溶劑和IDD中添加甲基鹵化鎂發(fā)生格氏加成反應(yīng)，再添加酸將格氏加成反應(yīng)得到的格氏物水解，然后減壓回收有機(jī)溶劑和加水進(jìn)行水析后得到所述去氫甲基睪丸素。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述營養(yǎng)培養(yǎng)基中包含葡萄糖、玉米漿、無機(jī)鹽、酵母膏、牛肉膏和蛋白胨中的一種或多種。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述微生物菌種為包括分枝桿菌屬、鐮孢屬和解淀粉芽孢桿菌中的一種或多種。