[發明專利]一種光磁雙模態指示細胞，其制備方法，其檢測方法及其在體內示蹤中的應用

在審

• 申請號: 201811548358.2
• 申請日: 2018-12-18
• 公開（公告）號: CN111334467A
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發明（設計）人: 袁蘭;韓鴻賓;王彤
• 申請（專利權）人: 北京大學;袁蘭
• 主分類號: C12N5/078
• 分類號: C12N5/078;G01N21/64;G01N24/08;A61K49/00;A61K49/08
• 代理公司: 北京漢德知識產權代理事務所(普通合伙) 11328
• 代理人: 劉子文;徐馳

本發明提供了一種光磁雙模態指示細胞的制備方法，其包括：將紅細胞懸于細胞等滲液中，并加入熒光染料和核磁造影劑，得到染色混合物；以及孵育染色混合物，再用細胞等滲液清洗染色混合物中的細胞，最后收獲細胞即得到光磁雙模態指示細胞。該制備方法制得的光磁雙模態指示細胞，以細胞作為光磁雙模態示蹤劑，可用于熒光及核磁共振雙模態成像，并可用于從細胞水平到整體水平反應生物的生理狀況。

技術領域

本發明屬于生物成像領域，具體涉及一種光磁雙模態指示細胞，其制備方法，其檢測方法及其在體內示蹤中的應用。

背景技術

近年來，生物成像技術的發展使得成像對象可以是機體，組織，細胞，甚至分子水平，其能夠反映活體狀態下分子水平的變化，并且對其生物學行為進行定性定量分析，這促進了藥物研究和臨床診療的發展。

光磁雙模態影像技術，通過將熒光與MRI的影像探針進行“合二為一”，使其能用兩種影像技術進行檢測，克服單一影像技術的固有局限性。MRI是目前研究最為成熟的影像技術之一，它能在機體深層次亞毫米水平上提供高分辨率的組織信息和三維結構成像，在科研和臨床中得到了廣泛的應用。但由于成像分辨率低、靈敏度低，難以達到微米水平，臨床應用受到很大限制。而光學顯微成像技術卻具有相當高的靈敏度，檢測限可達到0.1-0.2微米，因此將MRI與光學成像技術進行聯合，即能提供高分辨率的結構組織學信息，同時又能實現深部結構的的功能學顯像，最終達到功能學顯像與結構組織顯像的完美統一。

光、磁成像需要借助光磁分子探針來增強信號。目前常見的光磁雙模態探針的設計主要基于兩種模式：第一種是熒光染料分子直接或間接螯合核磁信號元素構成。第二種方法是利用納米技術構建功能化的納米雙模態體系，在納米材料上修飾熒光染料或磁性顆粒構成。然而上述兩種方法得到的光磁雙模態探針都是溶液狀態，難以從細胞水平反應生物的生理狀況，例如在血管成像過程中難以直接檢測血流中紅細胞速度，并且分子探針容易滲透出血管壁，分布到血管壁周圍組織中。

發明內容

本發明的目的是提供一種光磁雙模態指示細胞的制備方法，其制備得到的光磁雙模態指示細胞可用于熒光成像及核磁共振成像。

本發明的另一個目的是提供一種光磁雙模態指示細胞，其可用于熒光成像及核磁共振成像，并可用于觀察紅細胞形態。

本發明的再一個目的是提供一種光磁雙模態指示細胞的檢測方法，其能夠對光磁雙模態指示細胞進行熒光成像及核磁共振成像。

本發明的還一個目的是提供一種光磁雙模態指示細胞在體內示蹤中的應用，其能夠在熒光成像及核磁共振成像下實現光磁雙模態指示細胞的體內示蹤。

本發明提供了一種光磁雙模態指示細胞的制備方法，其包括：將紅細胞懸于細胞等滲液中，并加入熒光染料和核磁造影劑，得到染色混合物；以及孵育染色混合物，再用細胞等滲液清洗染色混合物中的細胞，最后收獲細胞即得到光磁雙模態指示細胞。

該制備方法制得的光磁雙模態指示細胞，可用于熒光及核磁共振雙模態成像，并可用于從細胞水平到整體水平反應生物的生理狀況。

在光磁雙模態指示細胞的制備方法的另一種示意性實施方式中，熒光染料選自螢黃CH二鉀鹽、異硫氰酸熒光素、羅丹明B和Alexa Fluor 594中的一種或多種的組合；核磁造影劑為釓噴酸葡胺。藉此可實現較好的熒光成像及核磁共振成像效果。