[發明專利]一種唾液酸化TF抗原內酯及其氟代類似物的合成方法

在審

• 申請號: 201811548160.4
• 申請日: 2018-12-18
• 公開（公告）號: CN109678913A
• 公開（公告）日: 2019-04-26
• 發明（設計）人: 孟欣;郁彭;董佩杰;梁健美
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: C07H15/04
• 分類號: C07H15/04;C12P19/18;C12P19/44;C07H1/00
• 代理公司: 天津盛理知識產權代理有限公司 12209
• 代理人: 趙瑤瑤

1.一種唾液酸化TF抗原內酯，其特征在于：結構通式如下：

其中：

R₁，選自氫原子、α-或β-構型絲氨酸殘基、α-或β-構型蘇氨酸殘基、疊氮取代烷基、炔基取代烷基、巰基取代烷基、α-或β-構型取代烷基之一；

R₂，選自氮乙酰氨基、氮丙酰氨基、氮三氟乙酰胺基、氮疊氮乙酰氨基之一；

R₃，選自氟原子、羥基之一；

R₄，選自氟原子、羥基之一；

R₅，選自氟原子、羥基之一；

R₆，選自氟原子、羥基之一；

R₇，選自氟原子、羥基之一；

R₈，選自氮乙酰氨基、氮丙酰氨基、氮三氟乙酰胺基、氮疊氮乙酰氨基；

R₉，選自氟原子、羥基之一；

R₁₀，選自氟原子、羥基之一；

R₁₁，選自氟原子、氫原子、疊氮、羥基之一。

2.一種權利要求1所述的唾液酸化TF抗原內酯的合成方法，其特征在于：包括以下步驟：

(1)利用“一鍋雙酶”法合成唾液酸化TF抗原及其氟代類似物，所述“一鍋雙酶”法唾液酸化中用到的酶類是指唾液酸CMP-合成酶和唾液酸轉移酶；

通式II所示的唾液酸化TF抗原及其氟代類似物：

其中：

R₁，選自氫原子、α-或β-構型絲氨酸殘基、α-或β-構型蘇氨酸殘基、疊氮取代烷基、炔基取代烷基、巰基取代烷基、α-或β-構型取代烷基之一；

R₂，選自氮乙酰氨基、氮丙酰氨基、氮三氟乙酰胺基、氮疊氮乙酰氨基之一；

R₃，選自氟原子、羥基之一；

R₄，選自氟原子、羥基之一；

R₅，選自氟原子、羥基之一；

R₆，選自氟原子、羥基之一；

R₇，選自氟原子、羥基之一；

R₈，選自氮乙酰氨基、氮丙酰氨基、氮三氟乙酰胺基、氮疊氮乙酰氨基之一；

R₉，選自氟原子、羥基之一；

R₁₀，選自氟原子、羥基之一；

R₁₁，選自氟原子、氫原子、疊氮、羥基之一；

(2)利用酰化反應將通式Ⅱ所示的化合物進行酰化，合成含有內酯結構的唾液酸化TF抗原內酯及其氟代衍生物,然后把脫除酰基保留內酯結構，得到化合物Ⅰ；

3.根據權利要求2所述的唾液酸化TF抗原內酯的合成方法，其特征在于：步驟(1)中的唾液酸化TF抗原及其類似物的合成方法：將TF二糖或氟代衍生物(1.0-5.0當量)、N-乙酰神經氨酸及其類似物(1.0-20.0當量)、CTP(胞苷三磷酸)(1.0-20.0當量)、MgCl₂(5.0-100mM)和Tris-HCl緩沖液(10-500mM,pH5.0-10.5)配制水溶液，加入唾液酸CMP-合成酶和一種唾液酸轉移酶，實現“一鍋雙酶”法對受體進行唾液酸化；反應完成后，純化即可直接獲得唾液酸化TF抗原及其氟代類似物。

4.根據權利要求2所述的唾液酸化TF抗原內酯的合成方法，其特征在于：所述“一鍋雙酶”法唾液酸化中用到的酶是NmCSS和PmST1，反應時間為5分鐘-30小時。

5.根據權利要求2所述的唾液酸化TF抗原內酯的合成方法，其特征在于：所述的酶法合成中反應溫度為0-37℃，轉速為0-240rpm；所述酶反應的停止方法是向反應中加入等體積的4℃甲醇并在4℃下培育0-30分鐘。

6.根據權利要求2所述的唾液酸化TF抗原內酯的合成方法，其特征在于：對通式Ⅱ所示的化合物，在冰浴條件下進行酰化反應，其中，使用吡啶為溶劑，10.0-50.0當量的乙酸酐為酰化試劑。