[發明專利]一種多菌種復合發酵生產優質生物飼料的方法

在審

• 申請號: 201811545526.2
• 申請日: 2018-12-17
• 公開（公告）號: CN109497266A
• 公開（公告）日: 2019-03-22
• 發明（設計）人: 孫倩;陳甲子
• 申請（專利權）人: 江蘇春之雨生物科技發展有限公司
• 主分類號: A23K10/12
• 分類號: A23K10/12;A23K10/37;A23K10/30
• 代理公司: 長沙新裕知識產權代理有限公司 43210
• 代理人: 趙登高

1.一種多菌種復合發酵生產優質生物飼料的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

1、菌種活化及擴培

1）平菇：將平菇菌種接種到改良PDA培養基斜面上，置于28℃培養進行活化，等菌絲長滿斜面后，將菌絲塊切割成1cm²小塊，接種1-2塊到裝有100mL液體培養基的250mL三角瓶中，置于28℃進行擴培，先靜置培養24h，然后置于140r/min的搖床上培養72h；

2）產朊假絲酵母：將產朊假絲酵母菌種接種到YPD瓊脂培養基平板上，置于30℃活化培養48h，用接種環刮取1環接種到裝有80mL YPD肉湯培養基的250mL三角瓶中，置于30℃、160r/min的搖床上培養48h；

3）黃孢原毛平革菌：將黃孢原毛平革菌菌種接種到改良PDA培養基平板上，置于30℃活化培養48h，用接種環刮取1環接種到裝有80mL液體培養基的250mL三角瓶中，置于30℃、160r/min的搖床上培養36h；

2、復合液體發酵

將發酵培養基按照60%左右的裝液量裝入發酵罐中高壓蒸汽滅菌，發酵培養基冷卻后接入4%擴培后的平菇菌種，培養66-78h，再將擴培后的產朊假絲酵母和黃孢原毛平革菌菌種分別按照3%的接種量接入，繼續培養60-80h，發酵培養的溫度控制在28-30℃、轉速控制在140-160r/min、通氣量控制在0.8-1.0V/V/M，獲得復合發酵液；

3、發酵液雙重輻照處理

上述復合發酵液在接種前先進行特定電磁波輻照處理，照射距離為30cm，輻照度為54mW/cm²，處理15min，再進行超聲波輻照處理，超聲頻率為30kHz，功率為10W，超聲時間30s，間隔時間30s，處理60min；

4、固體發酵

按照15%左右的接種量將處理后的發酵液接入生物飼料基料中，基料的組分為（按質量分數計）：玉米秸稈17-23%，大豆秸稈17-23%，小麥秸稈10-12%，大豆餅粕14-18%，花生餅粕8-10%，芝麻餅粕7-9%，平菇菌糠6.6-7.8%，黃腐酸3.5-4.0%，微晶纖維素2.5-3.0%，（NH₄）₂SO₄ 1.6-2.2%，KH₂PO₄ 0.25-0.29%，K₂HPO₄0.11-0.15%，MgSO₄·7H₂O 0.19-0.21%，含水量調節為40-60%，初始pH值為5.0-6.0，混合均勻后在溫度28-30℃的條件下通風培養5-6d，將發酵后的產物于80℃烘干，粉碎，即得生物飼料。

2.根據權利要求1所述的一種多菌種復合發酵生產優質生物飼料的方法，其特征在于，所述步驟1中，平菇選擇中高溫類或廣溫類品種。

3.根據權利要求1所述的一種多菌種復合發酵生產優質生物飼料的方法，其特征在于，所述步驟1中，改良PDA培養基的組分為（按1L計）：去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂粉20g，KH₂PO₄ 2g，MgSO₄·7H₂O 1g，FeSO₄·7H₂O 5mg，CuSO₄·5H₂O 0.3mg，維生素B1 10mg，余量為純化水，自然pH值。

4.根據權利要求1所述的一種多菌種復合發酵生產優質生物飼料的方法，其特征在于，所述步驟1中，液體培養基的組分為（按1L計）：葡萄糖28-32g，酵母膏3.8-4.4g，蛋白胨2.6-3.0g，麥芽汁10-15ml，KH₂PO₄ 2.8-3.2g，MgSO₄·7H₂O1.4-1.6g，蛋氨酸鋅2.6-3.0mg，甘氨酸鐵6.3-6.5mg，6-BA 2.8-3.4mg，余量為純化水，自然pH值。