[發(fā)明專利]一種PRR11在食管癌組織及食管癌細(xì)胞系中使用方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811544517.1
• 申請日: 2018-12-17
• 公開（公告）號: CN109576369A
• 公開（公告）日: 2019-04-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳潔;亢春彥;楊紅梅
• 申請（專利權(quán)）人: 河南醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/867;G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 西安銘澤知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 61223
• 代理人: 李振瑞

本發(fā)明公開了食管癌技術(shù)領(lǐng)域的一種PRR11在食管癌組織及食管癌細(xì)胞系中使用方法，該P(yáng)RR11在食管癌組織及食管癌細(xì)胞系中使用方法包括如下步驟：PRR11在食管癌組織中的表達(dá)及意義；本發(fā)明通過分析食管鱗癌組織中PRR11的表達(dá)與性別、年齡等臨床病理特征的相關(guān)性，對食管癌患者預(yù)后的預(yù)測，并通過選擇PRR11mRNA表達(dá)水平較高的食管鱗癌EC109細(xì)胞系，采用慢病毒轉(zhuǎn)染法構(gòu)建PRR11穩(wěn)定低表達(dá)的EC109細(xì)胞系，通過體外的細(xì)胞增殖活力實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)等研究PRR11表達(dá)對食管鱗癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響，能夠通過對PRR11的使用從而提高食管癌的診斷、治療及預(yù)后的預(yù)測。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及食管癌技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種PRR11在食管癌組織及食管癌細(xì)胞系中使用方法。

背景技術(shù)

在全球范圍內(nèi)，惡性腫瘤成為威脅人類生命健康的主要?dú)⑹帧８鶕?jù)衛(wèi)生部2006年發(fā)布的中國衛(wèi)生事業(yè)發(fā)展情況統(tǒng)計(jì)公報(bào)顯示，在我國，自上世紀(jì)90年代以來，惡性腫瘤一直處于城市居民的死亡原因的首位；在農(nóng)村居民死亡原因中也于2006年躍居第一位。因此，開展惡性腫瘤的相關(guān)研究，開發(fā)出基礎(chǔ)理論和應(yīng)用研究對于闡明腫瘤發(fā)生發(fā)展的機(jī)制、腫瘤防治、降低惡性腫瘤的發(fā)病率死亡率等都具有重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。惡性腫瘤的發(fā)生是一個(gè)多因素作用、多基因參與、經(jīng)過多個(gè)階段才最終形成的極其復(fù)雜的生物學(xué)現(xiàn)象，其中癌基因和抑癌基因的表達(dá)失調(diào)進(jìn)而誘發(fā)的細(xì)胞生長失控在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著至關(guān)重要的作用。目前，仍有大量的新的腫瘤相關(guān)基因有待發(fā)現(xiàn)，對其功能的闡明不僅直接有助于對腫瘤發(fā)生機(jī)制的闡明，而且可能作為有效的生物靶點(diǎn)用于新型腫瘤診斷方法、抗腫瘤藥物的開發(fā)。PRR11基因是最近在惡性腫瘤相關(guān)新基因挖掘與篩選研究中發(fā)現(xiàn)的一個(gè)新的腫瘤相關(guān)基因，在國內(nèi)外開展該基因的生物學(xué)功能和表達(dá)調(diào)控機(jī)制等相關(guān)研究，該基因參與細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期和細(xì)胞癌變等多種生物學(xué)過程，目前PR11多在在肺癌、胃癌和胰腺導(dǎo)管腺癌得到極大的使用，但是在食管癌中還未有重大且凸出的使用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種PRR11在食管癌組織及食管癌細(xì)胞系中使用方法，以解決上述背景技術(shù)中提出的PRR11基因是最近在惡性腫瘤相關(guān)新基因挖掘與篩選研究中發(fā)現(xiàn)的一個(gè)新的腫瘤相關(guān)基因，在國內(nèi)外開展該基因的生物學(xué)功能和表達(dá)調(diào)控機(jī)制等相關(guān)研究，該基因參與細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期和細(xì)胞癌變等多種生物學(xué)過程，目前PR11多在在肺癌、胃癌和胰腺導(dǎo)管腺癌得到極大的使用，但是在食管癌中還未有重大且凸出的使用的問題。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種PRR11在食管癌組織及食管癌細(xì)胞系中使用方法，其特征在于：該P(yáng)RR11在食管癌組織及食管癌細(xì)胞系中使用方法包括如下步驟：

S1：PRR11在食管癌組織中的表達(dá)及意義；

S2：PRR11在食管癌細(xì)胞系EC109中的表達(dá)及構(gòu)建PRR11穩(wěn)定低表達(dá)的食管癌細(xì)胞系；

S3：PRR11對食管癌細(xì)胞系生物學(xué)行為的影響。

優(yōu)選的，所述PRR11在食管癌組織中的表達(dá)及意義包括如下步驟：

A1：免疫組化方法檢測食管鱗癌組織及腫瘤周圍2cm以上癌旁組織中PRR11的蛋白表達(dá)；

A2：使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)測定食管鱗癌組織及癌旁組織中PRR11mRNA表達(dá)水平；

A3：分析食管鱗癌組織中PRR11的表達(dá)與性別、年齡、腫瘤大小、腫瘤分期、組織分級、浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理特征的相關(guān)性，通過構(gòu)建Logistic回歸模型探討PRR11對食管癌患者預(yù)后的預(yù)測意義。

優(yōu)選的，所述PRR11在食管癌細(xì)胞系EC109中的表達(dá)及構(gòu)建PRR11穩(wěn)定低表達(dá)的食管癌細(xì)胞系包括如下步驟：

B1：利用Westernblot和Realtime-PCR技術(shù)檢測PRR11在人源性食管鱗癌細(xì)胞系EC109中的表達(dá)水平；